1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
本项目鼎湖鳞伞菌多糖在体外三种模拟消化液中的消化作用。多糖作为人类日常饮食的重要构成部分,研究表明其大部分在肠道中被微生物利用,代谢过程中产气及生成短链脂肪酸。已有研究证实在体外人类粪样厌氧发酵模型中,多糖能够有效促进短链脂肪酸的生成,促进有益微生物如双歧杆菌、乳杆菌等的生长。但由于体内消化研究的复杂性,对多糖在唾液及胃肠道消化液中的消化、吸收情况知之甚少。近年来,体外模拟胃肠液消化模型由于具有简单易行、成本低、重复性好等优点广泛用于分析多糖在消化液中的变化。
[1] 田恩静.中国鳞伞属[pholiota( fr.) kummer]真菌分类学研究[d].长春:吉林农业大学,2005.
[2] 田恩静,图力古尔.中国鳞伞属( 广义) 已知种类及其分布[j].菌物研究,2004,2( 1) : 25-34.
2. 研究的基本内容和问题
以我国特有的鼎湖鳞伞菌发酵提取粗多糖(PDP)。通过体外模拟人体消化系统,分别模拟了唾液、胃液和胃肠液对多糖的消化作用。PDP经DEAE sepharose Fast Flow凝胶阴离子交换柱及sephadex G-100 凝胶过滤柱纯化得到纯化组分,以备后续试验使用。
3. 研究的方法与方案
以我国特有的鼎湖鳞伞菌发酵提取粗多糖(PDP)。通过体外模拟人体消化系统,分别模拟了唾液、胃液和胃肠液对多糖的消化作用。鼎湖鳞伞菌多糖样品的单糖组成分析,参照Dai[12]等报道的PMP衍生化HPLC分析法,并做适当修改。DNS法测定唾液消化后多糖中还原糖的含量。多糖胃液消化产物分子量,多糖胃肠液消化产物分子量测定采用分子排阻高效液相色谱(HGPLC)法,并进行一定的修改。PDP经DEAE sepharose Fast Flow凝胶阴离子交换柱及sephadex G-100 凝胶过滤柱纯化得到纯化组分,以备后续试验使用。
近年来,体外模拟胃肠液消化模型由于具有简单易行、成本低、重复性好等优点广泛用于分析多糖在消化液中的变化。本实验室近几年来在各种低聚糖、茶叶多糖的提取、 纯化、结构解析与生物活性方面做了大量的研究工作,积累了丰富的实验经验。
4. 研究创新点
本项目拟采用体外消化模型研究我国特有种鼎湖鳞伞菌多糖在三种消化液中的消化作用,目前尚未有报道,属创新之处。
5. 研究计划与进展
第一阶段 准备阶段
时间:2015年10月1日至2015年10月31日
内容:进一步查阅国内外相关文献资料,完善知识储备。熟悉项目涉及内容,完成各实验阶段的步骤设计以及实验原料、器材的准备工作。
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