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1. 研究目的与意义
研究内容、目的及意义:
乳酸是一种公认的三大有机酸之一，最近几年的应用领域不断扩大，需要越来越多的高品质 L-乳酸。如何进一步提高乳酸产业的发酵浓度、生产强度、转化率是当前乳酸工业面临的首要问题。本论文在前期通过途径改造删去旁路代谢，获得一株木糖产 L-乳酸代谢工程菌，针对其木糖利用率低产酸能力弱进一步增强木糖异构酶木酮糖激酶和 L-乳酸脱氢酶的表达，研究其在厌氧条件下利用木糖制备 L-乳酸的发酵规律，对于真正实现木糖制备乳酸的应用具有重要意义。
2. 国内外研究现状分析
2.3 大肠杆菌代谢工程产l-乳酸国内外进展
2.3.1 生产l-乳酸的菌种和方法选择
乳酸(lactic acid)学名为2-羟基丙酸(2-hydroxypropanoic acid)，分子式为c3h603，结构式为ch3chohcooh。由于其分子内含有一个不对称碳原子，因此具有旋光性，d-乳酸为左旋，l-乳酸为右旋，dl-乳酸为消旋型。随着基因工程的飞速发展和广泛应用，利用基因工程的方法构建l-乳酸高产菌株成为人们研究的焦点。但是自然界中能生产 l-乳酸的微生物极少。
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3. 研究的基本内容与计划
3. 研究内容及计划
3.1 实验方案
① 建立实验必须的分析方法
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4. 研究创新点
4. 特色与创新
以大肠杆菌 K12(pflB, ldhA, ackA-pta ,frdA, adhE::ldhL)为出发菌种，分别将来自于凝结芽孢杆菌的木糖异构酶基因和木酮糖激酶基因，以及乳酸脱氢酶基因以质粒形式导入该菌株中，获得的重组菌种与出发菌株利用木糖发酵制备乳酸，通过观察各自乳酸产量，分析影响出发菌乳酸产量的因素。这为优化大肠杆菌利用木糖高产L-乳酸奠定基础。
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