1. 研究目的与意义
对草菇木聚糖酶与其它糖苷水解酶的协同作用进行研究,有助于了解草菇对半纤维素的利用机理,从而进一步提高草菇的产量和生物学效率;同时有助于促进木聚糖酶和低聚木糖的生产和扩大他们的应用范围,创造出更为巨大的经济效益和社会效益
2. 国内外研究现状分析
1990年,luthi等用大肠杆菌为受体菌尝试表达来源于caldocellumsacharolyticum的耐热木聚糖酶基因xyna,控制xyna的启动子采用表达载体pjla602的湿度诱导的pr和pl启动子。xyna的表达量可达到细胞总蛋自的20%以上,并且表达的xyna具有正常的生物学活性,与原始天然酶无显著差异。
1993年,sung等根据大肠杆菌的密码子偏向人工合成的环状芽孢杆菌(bacillus circulans)木聚糖酶编码基因,并采用lae启动子,结果重组木聚糖酶在细胞周质中的表达量高达300mgt l发酵液。
1993年shendye,1996年lapidotd等176]也同样利用大肠杆菌作为受体菌分别表达了来源于bacillus的耐热木聚糖酶,后者用t7启动子驱动木聚糖酶基因,表达量达到细胞总蛋白的70%。
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3. 研究的基本内容与计划
研究内容:
⑴熟悉掌握草菇木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达及蛋白的纯化;
⑵研究草菇木聚糖酶的各项基本酶学特性;
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4. 研究创新点
首次利用酵母对木聚糖酶进行培养,并对其酶学性质和与其它糖苷水解酶的协同作用进行了研究,为以后进一步了解木聚糖酶的特性奠定了基础。
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