1. 研究目的与意义
作为一种普遍存在的翻译后修饰, 糖基化对蛋白质的结构和功能有着重要影响, 蛋白质的糖基化, 特别是N-连接糖基化普遍发生在细胞外环境的蛋白质中,弄清糖基化发生发展的规律是理解蛋白质复杂多样的生物功能的一个重要前提。
本论文通过定点突变的方法去果胶酸裂解酶N-糖基化,进而研究其对该酶酶学性质的影响。
2. 国内外研究现状分析
目前国内外研究和应用较多的果胶酶产生菌是细菌和霉菌,也有链霉菌产生果胶酶的报道。
在细菌中,嗜碱性芽孢杆菌属和欧文氏杆菌属主要用于在苎麻和红麻的脱胶、生物制浆及污物的处理软化等方面,应用前景可观,受到较多的关注和研究。
而关于糖基化修饰对酶学性质的影响的研究进展的并不是很多,此论文就旨在研究草菇果胶酸裂解酶n-连接糖基化的酶学性质变化。
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3. 研究的基本内容与计划
研究内容如下:
1.果胶酸裂解酶n-糖基化位点的预测;
2.通过定点突变的方法去n-糖基化;
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4. 研究创新点
(1)改变碱基进行目的基因的定点突变;
(2)对不去糖基化、上下游单独去糖基化和上下游同时去糖基化的目的基因表达产物进行全面的酶学性质的比较。
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