从堆肥中筛选耐热脂肪酶产生菌开题报告

1. 研究目的与意义

脂肪酶可在油水界面或水不溶性系统中催化交换、酸解、水解、胺解、转酯、醇化、酯化等化学反，应具有立体选择性、化学选择性、底物专一性和位点选择性等特点，可被应用于洗涤、制革、食品、生物化工、造纸、医药等行业。

现在工业生产用的脂肪酶大多为中温脂肪酶，这类酶的最适作用温度在30-40℃左右，当温度升高时，脂肪酶的活性明显降低，从而限制了其使用范围。

本课题从堆肥中筛选耐热型脂肪酶产生菌，并对其产酶水平进行初步分析，旨在为获得高效的耐热脂肪酶打下基础。

2. 国内外研究现状分析

关于脂肪酶选育研究进展,1970年筛选出产碱性脂肪酶酵母菌，1988年丹麦novo公司将米赫毛霉碱性脂肪酶基因克隆入适合发酵生产的菌种米曲霉中，这是有史以来第一个运用基因工程技术生产的碱性脂肪酶。中国李江华以圆弧青霉变株为出发株，通过多次诱变，筛选抗真菌抗生素的抗性株一株己酸抗性突变株pg3其酶水平比出发株pb227菌株提高了1.5倍。

福建师大生物工程学院施巧琴教授于我国碱性脂肪酶的研究始于1970年代，1981年发表了我国第一篇关于碱性脂肪酶产生菌变株un一503的选育的研究论文.吴松刚1991年和1992年分离筛选出一种碱性脂肪酶;周延利用紫外线、快中子、磁场复合诱变，得到了发酵液酶活为424.60u/m1的变株，此酶活为出发菌的3.0倍。

张荃花等报道一株无花果假丝酵母的脂肪酶，乔红群等研究筛选出根霉菌所产的热稳定性良好脂肪酶,该酶在40℃下ph6一9时酶活力基本不损失，最适ph7.o，到ph大于9以后，活力下降很快。乌尽敏辰等圆弧青霉突变株酶学特性研究结果表明，该酶在30℃以下稳定，ph稳定范围较广。

3. 研究的基本内容与计划

一.研究内容：

（1）收集相关资料，确定采样方案，从南京地区采集微生物堆肥样品；

（2）设计选择性培养基及培养条件，通过富集培养法，富集耐热型微生物；

4. 研究创新点

本论文是对耐热型脂肪酶产生菌株进行筛选，并对菌株产酶水平及酶学性能进行初步研究，为耐热型脂肪酶高产菌株的筛选打下一定的基础。