构建产高葡萄糖耐受β-葡萄糖苷酶bgl4H黑曲霉表达体系开题报告

1. 研究目的与意义

研究目的: 提高高葡萄糖耐受β-葡萄糖苷酶bgl4H的产量。

研究意义：丝状真菌是重要的工业生产菌，其自身强大的表达及蛋白分泌能力，使其在工业酶制剂生产中占据了核心地位，而黑曲霉以其安全无毒的特性得到广泛的认可，被认为一种生产医药食品类应用酶制剂的生产菌，但目前对黑曲霉的基因工程改造及遗传工程的研究仍有待进一步探索，其中对黑曲霉转基因的方法及条件的选择是其中的关键。

2. 国内外研究现状分析

β-葡萄糖苷酶作为纤维素酶的一个重要组成部分，β-葡萄糖苷酶的水解是纤维素彻底为单糖的一个瓶颈。

采用基因工程与蛋白质工程手段获得优良的β-葡萄糖苷酶已成为热点。

在β-葡萄糖苷酶对纤维二糖的水解过程中，当产物葡萄糖大量积累之后，会对其催化反应产生强烈的产物反馈抑制而使得酶解效率降低，由此科学家对黑曲霉属的β-葡萄糖苷酶进行了很多基础性研究，例如开展了不同种类的β-葡萄糖苷酶的分离、纯化和定性，以及基因的克隆表达等研究。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容:

1.构巢曲霉gpda启动子和nos polya终止子的克隆

2. 转化条件的选择以及参数的确定

4. 研究创新点

本研究通过对黑曲霉AMTM转化法条件的优化，以提高转化效率并得到高效表达高葡萄糖耐受β-葡萄糖苷酶bgl4H基因的黑曲霉基因工程菌株。