1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）
文 献 综 述1．引言黑曲霉（asperillus niger）作为工业应用的常用菌种之一，其产品具有高度的稳定性和安全性。
其产品一是以糖化酶为代表的酶制剂，二是以柠檬酸为代表的有机酸。
柠檬酸作为食品、化工、医药等领域需求量极大的有机酸，其目前传统的深层液体发酵工艺却存在诸多弊端，例如副产物多，耐受性差，转化率低等问题。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
1.课题任务熟悉实验室基本操作规范和常见问题处理；系统了解文献查阅过程；掌握ovetlapPCR和PCR扩增的基本操作过程和原理；掌握生物膜表征测定实验的原理和方法；掌握黑曲霉发酵生成柠檬酸的操作过程和原理。
2. 实验流程总结在烟曲霉菌基因组中分析到AcuM的基因后，对其进行PCR扩增，得到单片段；通过overlapPCR技术连接三个基因片段；进行黑曲霉原生质体转化实验；选择转化成功的黑曲霉菌落，进行菌落PCR验证，传代培养；对菌株进行生物膜表征测定（SDS、刚果红抗逆性实验，结晶紫染色实验），观察生物膜有何变化；进行发酵，测定柠檬酸的含量，与正常黑曲霉比对。
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