产甘露聚糖酶毕赤酵母基因工程菌的构建与表达开题报告

1. 研究目的与意义

本论文试图通过基因工程手段，将构建好的产甘露聚糖酶目的基因片段X6907G与pPICZαA构建成含目的基因的重组质粒pPICZαA-MAN，并将其导入大肠杆菌中进行大量扩增后导入毕赤酵母细胞系统，以实现基因工程菌对甘露聚糖酶的高效表达，用于工业化生产。

2. 国内外研究现状分析

国内外对β-甘露聚糖酶、甘露寡糖生产方法的研究涉及酶的生产、纯化与特性研究、 基因克隆与重组表达以及甘露寡糖的酶法生产等方面。

近年来,甘露聚糖酶基因工程已把宿主菌从大肠杆菌等原核生物扩展至酵母、霉菌等真核微生物以及植物，通过构建合适的表达载体及采用适宜的宿主等手段使某些甘露聚糖酶聚糖酶基因得到高效表达,并可将表达产物分泌到胞外。

3. 研究的基本内容与计划

利用毕赤酵母表达系统构建一株生产甘露聚糖酶的基因工程菌，并实验高效表达。

研究计划：

2011.22011.3 含甘露聚糖酶基因重组载体的构建、含甘露聚糖酶基因转化子的获得和筛选。

4. 研究创新点

本论文试图通过基因工程手段，将构建好的产甘露聚糖酶目的基因片段X6907G与pPICZαA构建成含目的基因的重组质粒pPICZαA-MAN，并将其导入大肠杆菌中进行大量扩增后导入毕赤酵母细胞系统，以实现基因工程菌对甘露聚糖酶的高效表达。

Pichia pastoris 表达系统是一种新型的外源基因表达系统，为工业化生产和纯化提供了极大的方便。