4、 Bacillus coagulans乳酸脱氢酶基因敲除的研究开题报告

1. 研究目的与意义

b.coagulans 是一种处于研究初期的微生物，通过一系列基因操作来探索它的遗传操作体系以用于实际生产。

利用基因敲除技术可阻断细胞的代谢旁路,或调节代谢流,优化代谢途径。

因此可以通过基因敲除手段来探索凝结芽孢杆菌的代谢途径。

2. 国内外研究现状分析

兼性厌氧嗜热芽孢杆菌，包括b. coagulans，与嗜温及需氧微生物相比，它们发酵则需要较少生产成本，目前已得到了研究者的广泛关注。

但是基于对b. coagulans相关的遗传背景了解不多，遗传操作体系不完整，对b. coagulans 分子改造工具很有限。

b.coagulans是一种不易于基因操作的微生物，转化及敲除等遗传操作效率不高，因此成熟的遗传操作体系亟待建立。

3. 研究的基本内容与计划

（1）建立实验必须的分析方法。

测定乳酸脱氢酶酶活力和蛋白浓度。

测定单糖和乳酸的浓度。

4. 研究创新点

从各种渠道收集了大量具有不同复制子的质粒，利用电转化的方法尝试将它们导入Bacillus coagulans中，检测这些质粒能否在其中复制。

挑选能复制的质粒，优化外源质粒导入条件，构建一套成熟的遗传操作系统，以便更好地改进该菌的遗传特性和代谢特性，这对于充分利用该菌生产各种有价值的化合物具有重要意义。