1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.研究背景:
食品在物理、生物化学和有害微生物等因素的作用下,会失去其固有的色、香、味、形成腐烂变质,而有害微生物的作用是导致食品腐败变质的主要因素。我国食品的杀菌防腐保鲜一直是以化学和物理手段为主,但随着社会的发展,国民的生活水平日益提高,人们对食品的各方面要求也逐渐提高,越来越多的人需求更加健康绿色,营养丰富,多样化,口感风味佳的食品。生物防腐剂不仅能满足人们的这些需求,且具有安全性、高抑菌能力强以及来源广泛等优点,成为食品防腐剂发展的重要方向。2. 研究目的:
ε-聚赖氨酸是一种优良的生物防腐剂,其天然、安全性高、水溶性高、抑菌谱广等诸多优势可满足人们对食品更新鲜、更健康、更有营养的需求。但由于菌种产率不高往往使得ε-聚赖氨酸价格较高。菌种改造对于提高菌株个体合成产物的能力是一种十分有效的方法。由于白色链霉菌的代谢途径还不清楚,所以现阶段选择传统诱变是提高其合成ε–聚赖氨酸能力的有效途径。因此本实验基于抗生素对白色链霉菌的选育,提高ε-聚赖氨酸的产量,且对ε-聚赖氨酸发酵性能的研究奠定基础。
2. 研究的基本内容和问题
1、研究内容
以实验室保藏的白色链霉菌作为研究对象,进行如下内容研究:
1)、利用抗性诱变方法,对白色链霉菌进行诱变选育,选用链霉素或庆大霉素作为其抗性物质。2)、将抗性物质链霉素或庆大霉素设置不同浓度梯度,得到最小抑菌浓度,在此条件下进行筛选高产抗性诱变株。3)、研究获得诱变株的发酵性能,对其生产条件进行初步研究。
3. 研究的方法与方案
1、培养方法1)平板和斜面培养:将白色链霉菌接种在平板或斜面上,然后放置在28℃恒温培养箱中,培养8-10d,使平板或斜面上长满白色孢子,具体时间看孢子生长情况,保藏备用。
2)种子培养:选取最小抑菌浓度平板培养基上生长的菌株,在超净工作台上,将菌株接种到斜面培养基上,然后放置在28℃恒温培养箱中培养7-10天,至菌株成熟。
4. 研究创新点
[1] shukla sc, singh a, pandey ak, mishra a. review on production and medical applications of ε-polylysine.biochemicalengineering journal, 2012, 65: 70–81.
[2] 李双,颜鹏,曾晨, 张宏建,毛忠贵,唐蕾. genome shuffling筛选 ε-聚赖氨酸高产菌及其对代谢流量分配的影响. 微生物学通报, 2016, 43(12): 2568–2577.
[3] 张龙,郑根成,潘龙,等. ε-聚赖氨酸高产改造菌发酵过程分析与工艺改进[j]. 工业微生物,2018,48( 3) : 17-23.
5. 研究计划与进展
1)、2020-2021-1学期17-20周~2020-2021-2学期第1周(2020-12-28~2021-3-7):查阅资料,准备开题报告,外文论文翻译;菌种的活化与出发菌株的筛选。
2)、第2周~第5周(2021-3-8~4-4):选取不同链霉素或庆大霉素浓度梯度平板培养出发菌株,确定出发菌株对链霉素或庆大霉素的最小抑菌浓度。
3)、第6周(2021-4-5~4-11):选取最小抑菌浓度平板上生长的菌株进行斜面培养7-10天至其成熟。
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