高产辅酶Q10类球红细菌化学诱变筛选研究开题报告

1. 研究目的与意义

辅酶 q₁₀（coenzyme q₁₀，coq₁₀）别名癸烯醌、泛醌（ubiquinone），是一种重要的生化药剂，作为一种重要的生化药物，辅酶q₁₀已被广泛的应用于医学领域。辅酶q₁₀在临床医学中的应用主要包括以下几个方面：

（1）用于心血管疾病方面，比如风湿性心脏病、缺血性心脏病、缩窄性心包炎等

疾病的治疗，同时也被用来辅助治疗充血性心力衰竭。

2. 研究内容和预期目标

本研究立足于国内外研究现状，在现代微生物育种技术、生物生化技术等多学科基础上，对类球红细菌进行ntg化学诱变，并对其发酵特性进行考察。具体内容如下：

1）活化保存的菌种，熟悉相关操作。

2）用化学试剂进行诱变，考察诱变处理时间、化学试剂浓度等因素的影响，确定最佳的 诱变参数。

3. 研究的方法与步骤

1）ntg化学诱变方法：

用一定值的磷酸缓冲液或tri缓冲液洗制成菌悬液。②ntg母液：配制需加助溶剂甲酰胺或丙酮少许，然后加缓冲液，其比例为缓冲液9ml:ntg丙酮溶液l ml，浓度为ntg 1 mg/ml；使用时取母液0.2 ml 菌悬液1.8 ml，ntg终浓度为100 μg/ ml。一般随菌种不同而异，细菌一般为100~1000 μg/ ml，放线菌、真菌为l000-3000 μg/ ml。③放线菌在生长适宜的温度下培养，（细菌30~35℃、真菌25~28℃、放线菌30~32℃）处理若干时间，一般细菌20~60 min，孢子90~120 min。④终止反应。冷的生理盐水50倍稀释处理，或经过离心洗涤处理，作一定稀释度分离于平皿。如果是细菌，把后培养基按一定浓度加入到菌体沉淀物中，振荡培养1.5~2 h，经2~3次细胞分裂，再涂平皿。

4. 参考文献

1 沈同.生物化学[m].北京：人民教育出版社，1990.331.

2 lenaz g. coenzyme q biochemistry,bioenergeticsand clinical application of ubiquinone[m],new york; a wiley inter-sciencepublication,1984.32-46

3王春林，中国大豆辅酶q₁₀ 的提取，分离和鉴定[j]，中国药工业杂志，1996,27（3）；101-105.

5. 计划与进度安排

1）2022-10-12～2022-11-20：查阅资料撰写开题报告；

2）2022-11-21～2022-11-30：将紫外诱变后菌种的活化,并熟悉系列操作；

3）2022-12-1～2022-01-20：用化学试剂进行诱变，考察诱变处理时间、化学试剂浓度等因素的影响，确定最佳的诱变参数；