人类VASH2蛋白的体外定点突变构建研究开题报告

1. 研究目的与意义

研究背景：伴随着学者对vasohibin蛋白质家族的深入研究，人们已经发现其中的vash2蛋白在血管新生的过程中具有一定的作用，为了研究vash2蛋白在血管新生过程中的作用机理，我们选择人类vash2蛋白的体外定点突变构建研究课题，探究vash2蛋白在人体内所扮演的角色。

目的：研究vash2蛋白与其他蛋白的作用机理及其功能与结构之间的关系

意义：为后续蛋白研究提供物质基础，学习掌握蛋白定点突变的技术方法

2. 研究内容和预期目标

主要研究内容：蛋白质酪氨酸化是蛋白质重要的功能调节之一，在细胞周期调控过程中起着重要的作用。本实验主要研究血管抑制蛋白（VASH2），研究表明该蛋白能与小分子血管结合抑制结合蛋白（SVBP）相结合，这两个蛋白相互作用后具有微管去酪氨酸活性，进而调节微管的组装与去组装。

预期目标：通过体外构建VASH2蛋白的重组蛋白，使其在大肠杆菌中进行表达。

3. 研究的方法与步骤

拟采用研究方法：实验法

步骤：

1. 查阅资料，选择突变位点
2. 设计引物，初步设计合成基因序列
3. 进行目标基因的扩增、剪切、细胞转化、细胞培养、转化子的检测以及重组子等
4. 基因扩增、质粒酶切后进行电泳检测，重组子构建检测以及蛋白表达电泳

4. 参考文献

主要参考文献：

1.程诚，郑瑞锋和王彦威；vash vash1 1和 和vash vash2 2表达对食管鳞状细胞癌患者预后的影响 表达对食管鳞状细胞癌患者预后的影响，2019，《癌症进展》，23期

5. 计划与进度安排

一、查阅文献，写出开题报告（2022年3月15日前完成）