融合CBD标签的内切菊粉酶的固定化研究开题报告

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1. 研究目的与意义

研究目的：菊粉酶是一类能水解菊粉生产果糖和果聚糖的酶。

前期实验中，将一个来源于黑曲霉的内切菊粉酶基因在大肠杆菌（escherichia coli bl21(de3)）中成功表达。

为了进一步提高重组菊粉酶的催化效率，本研究将纤维素结合域cbd融合到内切菊粉酶成熟蛋白的n端，此时得到的重组内切菊粉酶非常容易特异性固定在微晶纤维素（avicel ph101）上。

2. 国内外研究现状分析

关于菊粉酶的研究始于20 世纪90 年代,主要研究集中于菌株筛选和酶学性质方面。

通常是从富含菊粉的植物根部土壤中富集筛选合成菊粉酶的微生物，产菊粉酶的微生物包括丝状真菌、酵母和细菌。

关于菊粉酶产量，真菌中最好的是黑曲霉。

3. 研究的基本内容与计划

1、内切菊粉酶基因的克隆该内切菊粉酶基因来源于实验室一株黑曲霉，之前实验中已将该基因克隆，以前期实验获得的质粒petduet-inu1为模板，pcr克隆该内切菊粉酶基因。

2、内切菊粉酶基因重组表达质粒的构建最终菌株。

标记为e. coli bl21(pet35b-inu1)。

4. 研究创新点

菊粉酶是一类能水解菊粉生产果糖和果聚糖的酶。

前期实验中，将一个来源于黑曲霉的内切菊粉酶基因在大肠杆菌（escherichia coli bl21(de3)）中成功表达。

本实验将纤维素结合域cbd融合到内切菊粉酶成熟蛋白的n端，使得到的重组内切菊粉酶非常容易特异性固定在微晶纤维素（avicel ph101）上，以此来进一步提高重组菊粉酶的催化效率。