1. 研究目的与意义
乳酸菌和梭菌是浓香型白酒发酵过程中的主要微生物类群,乳酸菌能够利用底物生成乳酸,维持酒醅的酸度;梭菌能够生成短链脂肪酸,它们与乙醇反应生成浓香型白酒的主体香味物质——酯类,但是这两个类群在白酒酿造系统中的相互作用尚不明晰。
本课题拟研究共培养时不同微生物的生物量,底物消耗和短链脂肪酸积累的变化规律,为阐明白酒酿造体系中不同类群微生物的相互作用关系提供实验数据支撑,为后续功能微生物生物强化打下良好的基础。2. 研究内容和预期目标
3. 研究的方法与步骤
1.单菌生理特征测定
1.1 生长曲线测定 (1) 液态培养:接种乳酸菌于mrs液体培养基中,置于37℃培养箱内,每隔2h取样测定其活菌数。取1ml菌液梯度稀释,取不同的梯度稀释液涂布于mrs平板上,37℃培养至菌落长出,选取菌落数为30300个的平板计数。(2) 固态培养:称取10g样品于90ml无菌水中,振荡混匀后取1ml上清液进行梯度稀释,取不同的梯度稀释液涂布于平板上,细菌涂布mrs培养基,30℃培养至菌落长出,选取菌落数为30300个的平板计数。
1.2 有机酸测定 高效液相色谱法 取10 g发酵样品,加入20ml超纯水,混合均匀后4℃、8000r/min离心5min取5ml上清液,分别加入0.5ml亚铁氰化钾(10.6%)和0.5ml硫酸锌(30%),4℃静置沉淀后用0.22m微孔滤膜过滤,取滤液测定其乳酸和乙酸峰面积,并根据峰面积分别计算出其中乳酸和乙酸的浓度hplc条件:流动相为ph2.5的30mmol/l磷酸二氢钠溶液,流速1ml/min,检测波长210nm,柱温30℃,进样体积20l。
4. 参考文献
[1] 庄孝杰, 吴群, 徐岩. 酱香型白酒酿造拜耳接合酵母生理代谢特征及其与地衣芽孢杆菌相互作用[j]. 微生物学通报, 2017, 44(2):251-262.
[2] 张鑫, 高爱武, 黄雅娟,等. 酵母菌与乳酸菌共培养发酵马铃薯渣的研究[j]. 食品工业科技, 2012(1):194-197.
[3] 江成英, 吴耘红, 王拓一,等. 利用马铃薯渣生产能量饲料菌种选择的研究[j]. 江苏农业科学, 2013, 41(1):201-202.
5. 计划与进度安排
1、2022-2022-1学期17-20周~2022-2022-2学期第1周~第2周(2022-12-25~2022-3-16),查阅资料,准备开题报告,外文论文翻译;
2、第3周~第6周(2022-3-19~4-13),完成实验前准备工作,配制各实验所需药品;
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