1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
一、本课题的意义
近年来,盐藻由于细胞内的蛋白质、脂肪、碳水化合物和维生素而被各国重视[1-3]。
盐藻是一种嗜盐的绿色微藻,属绿藻门,绿藻纲,团藻目,盐藻科,盐藻属。盐藻没有细胞壁,细胞外只有一层弹性膜,所以体形变化很大,有梨形、椭圆形、长颈形和纺锤形等。原生质体中央有一个细胞核。前端生出两条等长的鞭毛,鞭毛比细胞长约1/3。细胞长16-24微米,宽10-13微米。盐藻是最耐盐的真核生物,可以在含0.05-5.5mol/l(约32.5%) nacl的培养液中生存,而且盐藻为广温性,可在4-40℃范围内存活,所以盐藻的分布范围相当广泛。
2. 研究的基本内容和问题
一、研究目标:
通过培养试验,分析盐藻细胞中不同形态砷含量和分布。
二、研究内容:
3. 研究的方法与方案
一、研究方法:
1 通过上网查找资料和阅读学校图书馆的相关书籍做好理论知识的储备。
2 相关藻类培养及优化设计理论的学习。
3 拟定以各种参数为变量的不同的方案进行对比。
4 对分析数据与结果进行全面的归纳整理,撰写毕业论文。
二、技术路线:
全部冻干样于2 mL离心管 |
加1mL水/甲醇(1:1),混匀30s,混匀器震荡2h,4500g离心10min,上清转至5mL离心管,重复2次,合并上清液 |
上清液 (溶解态) |
残渣 |
移入5ml离心管70C水浴去除有机溶剂 |
1ml1%HNO3提取两次 |
残 余 态 |
保存待测 |
三、实验方案:
1、 样品处理:正常N、P浓度,加MOPS控制pH=7.30,初始OD值=0.036,As(V)处理浓度分别为11.2ppb,1.12ppm,As(Ⅲ)处理浓度分别为11.2ppb,1.12ppm。藻总体积2L。培养7d收获,7000rpm离心后,冷冻干燥。
2、 形态提取步骤:
溶解态提取:
1、 分别称取经冷冻干燥的盐藻样品于2 mL离心管;
2、 向离心管中加入1mL水/甲醇(1:1)混合溶液,混匀30s,混匀器震荡2h;
4500g离心10min,上清转至5 mL离心管,重复提取2次,合并上清液(约3 mL);
3、 将上清液(溶解态)移入5ml离心管,70C水浴去除有机溶剂甲醇,待测;
残余态提取:
1、 向残余中加入1mL1%稀硝酸;
2、 4500g离心10min,重复提取1次后待测。
四、可行性分析:
1、具有微生物基本实验操作水平,参加过SRT实验设计,并对该项目具有很高的积极性;
2、通过查阅资料,已经具备了充足的相关理论知识及相应的实验操作技能;
3、有经验丰富的老师和师兄给予理论指导与帮助,同时我个人有较强的动手能力和解决问题的能力;
4、生科院提供盐藻检测的相关实验设备
全部冻干样于2 mL离心管 |
加1mL水/甲醇(1:1),混匀30s,混匀器震荡2h,4500g离心10min,上清转至5mL离心管,重复2次,合并上清液 |
上清液 (溶解态) |
残渣 |
移入5ml离心管70C水浴去除有机溶剂 |
1ml1%HNO3提取两次 |
残 余 态 |
保存待测 |
4. 研究创新点
特色或创新之处
目前盐藻细胞砷含量的研究不少。但是关于盐藻细胞内砷分布的研究很少。此次盐藻细胞砷含量和分布的的研究,将盐藻对砷的吸收转化提到细胞水溶态与残余态的亚细胞层次上,更具研究意义。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展
第一阶段:准备阶段
15年1月1日~15年1月5日:查资料,翻译英文资料、写专业文献综述;
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