不同芽胞杆菌对香蕉枯萎病病原菌拮抗作用研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

香蕉是重要的热带水果，经济价值高，种植面积广。

随着种植规模日益扩大，交通运输、香蕉保鲜的技术的改善及人民生活水平的提高，香蕉连作障碍大面积爆发 [1] 。

其中香蕉枯萎病就是最重的连作病害之一[2] ，香蕉枯萎病的防治迫在眉睫。

2. 研究的基本内容和问题

（一） 研究目标1. 拮抗香蕉枯萎病病原菌尖孢镰刀菌 芽孢杆菌的筛选和纯化；2. 不同芽孢杆菌与香蕉枯萎病病原菌的对峙实验，并通过高效液相色谱法分析不同菌株产iaa能力；3. 不同芽孢杆菌组合和入侵实验，；4. 通过成膜实验检测不同菌株组合对成膜能力的影响。

的作用，并借助不同菌株的碳源、氮源利用情况分析成膜作用中不同组合的关系；（二） 研究内容本实验拟从香蕉枯萎病的高发病土壤中筛选分离具有拮抗尖孢镰刀菌作用的芽孢杆菌，通过分离、纯化获得多株功能稳定的菌株。

挑取上述菌株与病原菌做对峙实验，比较不同菌株的拮抗效果。

3. 研究的方法与方案

（一） 研究方法利用土壤微生物学、分子生物学和生态学相关理论知识及实验技能，结合对香蕉枯萎病致病菌的相关研究，利用实验室条件，对香蕉根际土中的拮抗芽孢杆菌进行筛选、纯化，通过对峙实验鉴定不同菌株拮抗病原菌的能力， 运用hplc方法检测不同菌株产iaa能力，利用断棒原理分析成膜和土壤入侵培育实验中不同组合菌株的相互作用，最终选定出具有高效防控香蕉枯萎病的拮抗菌组合（组合不局限于多菌株）。

（二） 技术路线（见附件）（三） 实验方案1、采集常年连作香蕉的健康和得病两种土壤中香蕉的根际土作为拮抗菌筛选的实验材料。

2、拮抗菌株的筛选2.1准备工作：2.1.1 pda培养基：200g土豆削皮后切成小块放到水里煮，沸腾后煮20min，过滤，向滤液中加入20g蔗糖，最后定容至1l，分装250/瓶，琼脂2.5g/100ml，ph自然，121℃灭菌30min，备用。

4. 研究创新点

本实验的创新之处在于，拮抗菌是经过组合的不同种芽孢杆菌，因此，可以筛选出在不同环境和处理条件下产生的拮抗菌株，相比单种芽孢杆菌作为拮抗菌株，这些拮抗菌株应该会具备更加优越和稳定的抗病能力，从而为以后更好的生物防治香蕉枯萎病提供优质的拮抗菌株。

5. 研究计划与进展

2017.4--2017.5采集土样、进行试验前的准备工作；2017.8--2017.10 对不同处理土样进行拮抗菌的初步筛选；对具备拮抗能力的菌株进行进一步分离纯化并甘油管保存；2017.11--2017.12活化拮抗菌株，进行对峙实验确定拮抗能力；2018.2--2018.3产IAA能力验证；2018.3--2018.4微量板测定不同组合微生物成膜的特性；2018.52018.6数据整理、分析，毕业论文撰写及毕业答辩。