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1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.课题的意义
现代农业生产过程中,土壤盐渍化是影响农作物生长并造成作物产量降低最常见的非生物胁迫。据统计,我国现代盐渍化土地面积约为3693公顷,残余盐渍化土地面积约为4487公顷,潜在盐渍化土地面积约为1733公顷,各类盐渍化土地面积总计约为1亿公顷,占全国可利用土地的13.3[1]。土壤的盐渍化会带来严重的农作物减产甚至绝收,因此,提高作物抗盐的能力是保证我国粮食产量稳定,促进国民经济发展的重要研究方向。
2. 研究的基本内容和问题
1.研究目标
通过本次实验,比较分析不同添加量的壳寡糖缓解油菜苗盐胁迫的作用,以确定缓解盐胁迫效果最佳的壳寡糖的添加量。
3. 研究的方法与方案
1.研究方法
以甘蓝型油菜苏油1号作为研究对象,进行催芽培养。严格控制油菜苗的生长环境,待油菜苗生长4周后,选取长势一致的油菜苗转入水培盒进行水培培养。水培时使用1/2Hoagl营养液。水培一周,待油菜苗适应水培环境后,开始施加预实验处理。
本实验设计7组预处理。空白组、加NaCl组,加NaCl和COS组,NaCl添加量均为100mmol/L,COS添加量分别为10mg/L、15mg/L、20mg/L、25mg/L、30mg/L。营养液每隔24 h更换一次,并于第48 h、96 h、144 h取样进行各项生长及生理指标检测。
若经过预处理,得知壳寡糖最适宜添加量位于15~25mg/L,则设置11组对照试验,控制COS添加量处于上述初步确定的范围。各对照组的油菜苗除在培养液中壳寡糖的添加量不同外,其他培养条件均相同。营养液每隔24 h更换一次,并于第48 h、96 h、144 h取样进行各项生长及生理指标检测。本实验所有处理均设计3次重复。
2.技术路线
3.实验方案
以甘蓝型油菜苏油1号作为研究对象,种子消毒后置于湿润的滤纸上进行催芽,约3天后,将露白的种子播种于营养土中。油菜苗生长环境为本课题组的光照培养室,控制光照时间为16 h,光培养温度控制为25℃,暗培养温度15℃,控制培养室湿度为65。待油菜苗生长4周后,选取长势一致的油菜苗转入水培盒(34 cm×23 cm×10 cm)进行水培培养。水培时使用1/2Hoagl营养液。水培一周,待油菜苗适应水培环境后,开始施加预实验处理。
本实验设计7组预处理,见表1。各处理组的油菜苗除在培养液中NaCl及壳寡糖的添加量不同外,其他培养条件均相同。营养液每隔24 h按表中的处理更换一次,油菜苗施加处理后分别于第48 h、96 h、144 h取样进行各项生长及生理指标检测。本实验所有处理均设计3次重复。
表1盐胁迫预处理实验设计
组号 | 组名 | 基础营养液 | NaCl添加量 | 壳寡糖添加量 |
1 | CK | 1/2 Hoagl营养液 | 0 | 0 |
2 | NaCl | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 0 |
3 | NaCl COS① | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 10mg/L |
4 | NaCl COS② | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 15mg/L |
5 | NaCl COS③ | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 20mg/L |
6 | NaCl COS④ | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 25mg/L |
7 | NaCl COS④ | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 30mg/L |
若经过预处理,得知壳寡糖最适宜添加量位于15~25mg/L,则设置11组对照试验,见表2。各对照组的油菜苗除在培养液中壳寡糖的添加量不同外,其他培养条件均相同。营养液每隔24 h按表中的处理更换一次,油菜苗施加处理后分别于第48 h、96 h、144 h取样进行各项生长及生理指标检测。本实验所有处理均设计3次重复。
表2 盐胁迫对照实验设计
组号 | 组名 | 基础营养液 | NaCl添加量 | 壳寡糖添加量 |
1 | 对照组① | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 15mg/L |
2 | 对照组② | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 16mg/L |
3 | 对照组③ | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 17mg/L |
4 | 对照组④ | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 18mg/L |
5 | 对照组⑤ | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 19mg/L |
6 | 对照组⑥ | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 20mg/L |
7 | 对照组⑦ | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 21mg/L |
8 | 对照组⑧ | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 22mg/L |
9 | 对照组⑨ | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 23mg/L |
10 | 对照组⑩ | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 24mg/L |
11 | 对照组⑾ | 1/2 Hoagl营养液 | 100mmol/L | 25mg/L |
测定油菜苗生物量时,每个处理每次取样量均不少于6株苗,用吸水纸将油菜苗根部的营养液吸干,用剪刀将油菜苗分为地上部分和地下部分,然后置于105℃烘箱中杀青30 min,随后将烘箱温度调至80℃烘干24 h,分别称取油菜苗地上部分和地下部分的干重。
K /Na 值的测定:称取1.00 g叶片组织,加入5 mL去离子水研磨成匀浆,5000 g离心15 min,上清液转移至100 mL容量瓶中定容,定容后用火焰分光光度计测定K 、Na 浓度。
4.可行性分析
①本实验严格控制实验室环境如温度、湿度等,保证油菜苗生长良好。
②实验已加入适量营养液,保证油菜苗生长不良不受其他因素干扰。
③实验中已设置空白和对照组。
4. 研究创新点
本实验比较分析不同壳寡糖添加量对缓解油菜苗盐胁迫的影响,确定缓解盐胁迫效果最佳的壳寡糖的添加量。本实验在前人基础上有了新的提升,已有研究表明壳寡糖可以缓解盐胁迫,却还未有实验研究最适宜的壳寡糖添加量对缓解作物盐胁迫的影响。
5. 研究计划与进展
第一周确定选题,查阅资料
第二周——第三周 撰写文献综述、开题报告
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