草莓内生放线菌的分离筛选及对草莓病原真菌的拮抗活性研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

放线菌是具有巨大实用价值的一类微生物，目前从微生物中发现的大约8000种生物活性物质中，近70%是由放线菌产生。

利用放线菌的次生代谢产物---抗生素制备的新农药，由于其具有无污染、不易使有害生物产生抗药性等特点已成为无公害农药的主体和未来农药的发展方向。

　　　草莓连作障碍在草莓产区普遍存在，对草莓种植业危害很大,是限制草莓产业发展的瓶颈。

2. 研究的基本内容和问题

实验目标：筛选出对草莓病原菌产生拮抗作用的内生放线菌。

内容：采自江苏省草莓种植基地（南京泉水镇、麒麟镇草莓种植大棚）的草莓植株中分离植物内生放线菌及从草莓根际土壤中分离土壤放线菌，分别与实验室保存的草莓病原菌进行抗性研究，寻找对草莓病原菌有拮抗作用的放线菌，并对其进行初步菌种鉴定，菌种活性鉴定和菌种数量测定等实验研究。

关键问题：筛选出有拮抗活性的内生放线菌及土壤放线菌的筛选。

3. 研究的方法与方案

研究方法及实验方案： ①草莓根际土样中放线菌分离:稀释平板涂抹法。

称取土壤样品，溶于无菌水中，充分振荡，静置30 min后，系列稀释成不同浓度，将系列浓度的悬液接种于高氏一号平板上，涂布均匀，置于28℃恒温培养箱内培养5～7 d，用记号笔对平板上不同的放线菌进行标记，编号并进行纯化。

②草莓内生放线菌的分离：用自来水洗掉草莓表面的泥沙等杂质。

4. 研究创新点

草莓连作障碍在草莓产区普遍存在,对草莓种植业危害很大,是限制草莓产业发展的瓶颈。

虽然提出很多解决方法，但都有不同程度的缺陷。

　　植物病害生物防治强调生态系的良性循环和环境保护,由于其社会效益、生态效益、长远利益而愈来愈引起人们的重视,是符合我国农业生产持久稳定发展要求的长期策略。

5. 研究计划与进展

2013.10-2013.12 实验方案进行修改确定，准备实验所需材料，采集土壤样品及草莓，分离放线菌。

2014.1-2014.3 放线菌拮抗实验，活性测定；2014.4-2014.6 放线菌固体发酵实验