1. 研究目的与意义
1.1 研究背景:
由于大多数蛋白质在组织细胞中都是和核酸等生物分子结合在一起,种类也成千上万,并且结构、性质上有许多相似之处,所以蛋白质分离提纯[1,2]是一项复杂的工作。蛋白质提纯的目的是增加产品的纯度和产量,同时又要保持和提高产品的生物活性,因此,要分离提纯某一种蛋白质,首先应选择一种含有目的蛋白质较丰富的材料。其次,应设法避免蛋白质变性,以制备有活性的蛋白质。对于大多数蛋白质来说,纯化操作都是在0-4℃的低温下进行,同时也要避免过酸,过碱的条件以及剧烈的搅拌和振荡。另外,还要设法除去变性蛋白质和其他杂蛋白,从而达到提纯的目的。
目前,亲和层析法是分离提纯蛋白质极为有效的方法[3]。是利用生物分子间专一的亲和力而进行分离的一种层析技术。人们很早就认识到蛋白质、酶等生物大分子物质能和某些相对应的分子专一而可逆的结合,可以用于对生物分子的分离纯化。但由于技术上的限制,主要是没有合适的固定配体的方法,所以在实验中没有广泛的应用。直到60年代末,溴化氰活化多糖凝胶并偶联蛋白质技术的出现,解决了配体固定化的问题,使得亲和层析技术得到了快速的发展。亲和层析是分离提纯蛋白质、酶等生物大分子最为特异而有效的层析技术,分离过程简单、快速,具有很高的分辨率,在生物分离中有广泛的应用。同时它也可以用于某些生物大分子结构和功能的研究。近年来应用最广泛的溴甲酚绿(bcg)[4],在纯化蛋白质中一直备受人们的重视。其亲和吸附的机理是由于染料配体与很多蛋白以及酶的活性位点相互作用,以模仿这些生物分子的底物、辅助因子或结合剂的形式与蛋白结合[5,6]。
2. 研究内容和预期目标
2.1 研究内容
本课题拟利用3-羟基肉桂酸和乳酸合成二元共聚物,进一步通过二硫苏糖醇对该共聚物进行处理,在分子链中控制性的引入部分羟基。以溴甲酚绿(bcg)为功能单体,将其和所得共聚物进行反应,制备带有bcg功能基团的共聚物,并研究其成膜条件,考察其结构及外部环境等对吸附行为的影响。
2.2 预期目标
3. 研究的方法与步骤
3.1 实验仪器和试剂
(1)仪器:圆底烧瓶,直形冷凝管,油浴锅,温度计,磁力搅拌器,核磁共振氢谱(nmr),傅里叶红外光谱仪(ftir),荧光分光光度计,紫外光谱(uv),热重分析仪(tg),激光粒度仪等。
(2)试剂:3-羟基肉桂酸(3hca),乳酸(la)、二硫苏糖醇(dtt)、溴甲酚绿(bcg)等。
4. 参考文献
[1] multilayer choline phosphate molecule modified surface with enhanced cell adhesion but resistance to protein adsorption[j]. langmuir, 2017, 33(33): 8295-8301.
[2] leskinen t , witos j , juan josé valle delgado, et al.adsorption of proteins on colloidal lignin particles for advanced biomaterials[j]. biomacromolecules, 2017, 18(9):2767-2776.
[3] 王金秋, 陈加传, 李柯萌, 等. 生物活性蛋白质分离纯化技术研究进展[j]. 食品工业, 2018, v.39;no.260(05): 265-269.
5. 计划与进度安排
(1) 2022-2022-1学期17-20周~2022-2022-2学期第1周~第2周(2020.12.27-2021.3.19),查阅资料,准备开题报告,外文论文翻译;
(2)第3周~第6周(2021.3.20-4.11),共聚物聚合行为的初步设计与实施;
(3)第7周~第11周(2021.4.12-5.9),进行相关聚合物材料的表征与测试,整理数据;
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