基因组DNA甲基转移酶调控灵芝三萜生物合成的作用分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

课题的意义、国内外研究进展、应用前景等（列出主要参考文献）

【课题意义】

“灵芝”隶属于真菌界fungi、担子菌门basidiomycota、伞菌纲agaricomycetes、多孔菌目polyporales、灵芝科ganodermataceae 的一类传统药用真菌的统称，在我国有着悠久的药用历史。其中三萜类化合物是灵芝中主要的药理活性物质之一，人们常把三萜产量的高低作为鉴定灵芝品质优劣的重要指标之一^[1]。现已有研究证明，灵芝三萜具有抗肿瘤、保肝护肝、抗人类免疫缺陷1型病毒（human immunodeficiencyvirus-1, hiv-1）及hiv-1蛋白酶活性、抗组织胺释放、抗衰老、抗微生物、降血脂、降血糖等作用^[2]。但由于灵芝中次生代谢产物灵芝三萜含量较低，不足以维持商业开发需求，因此，研究灵芝三萜生物合成分子机制成为提高灵芝食药用价值的重要手段。

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标、内容和拟解决的关键问题

【研究目标】

本次研究通过构建prmt1和prmt3的基因沉默和过表达载体并导入灵芝细胞中，检测灵芝中灵芝三萜的含量差异来确定prmt1和prmt3基因对灵芝三萜合成的影响。

3. 研究的方法与方案

研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析

【研究方法及实验方案】

1.cdna序列比对，在灵芝基因库中筛选出prmts家族基因

4. 研究创新点

特色或创新之处

目前对于提高灵芝三萜的手段还停留在基因水平，表观遗传学对灵芝三萜合成的调控

作用研究还很少。本研究通过基因筛选出蛋白精氨酸甲基转移酶prmt1和prmt3基因，研究其在灵芝三萜生物合成过程中的作用。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展

2019.9-2020.4：熟悉基本的实验理论并且锻炼基本的实验能力，得到正确的沉默和过表达转化子并转入灵芝

2020.4-2020.5：筛选阳性转化子，并测定灵芝三萜的含量