1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1本课题的意义
胡萝卜(daucus carota l.)属于伞形目(apiales)伞形科(apiaceae)胡萝卜属两年生草本植物。胡萝卜作为常见的蔬菜作物,富含多种有益于人体健康的成分,是一种营养价值极高的经济作物;与此同时也是难得的果、蔬、药兼用的食材[1],因为其易种植、易存活、营养价值高的特性,在全国各地被广泛栽培。
紫胡萝卜是胡萝卜的一个品种,其颜色与传统的胡萝卜大相径庭,外观呈现紫黑色[2]。紫色胡萝卜中花青苷含量很高。有些紫胡萝卜品种的肉质根中花青苷含量最高能达到1750mg/kg 鲜重[3]。花青素属于多酚类物质且是紫胡萝卜重要的生物活性物质,不仅有较强的抗氧化能力,是一种天然、高效的抗氧化剂,还有预防高血压、抗菌、抗炎、抗癌等作用,此外还有改善视力和眼部疲劳的功效,对人类的健康有很大益处[4-8]。同时紫胡萝卜被认为是最早出现的胡萝卜,后来才逐渐衍变出了黄色、红色、白色和橙色的胡萝卜。研究花青苷合成机理,对研究胡萝卜的进化历史具有重要的意义。
2. 研究的基本内容和问题
1研究目标
验证全紫胡萝卜中带自身启动子和终止子的dcmyb7转入橙色胡萝卜是否能使其肉质根的表皮、韧皮部和木质部都合成花青苷。
2研究内容
3. 研究的方法与方案
1研究方法
提取‘deeppurple’紫胡萝卜中的dna。根据胡萝卜全基因组和转录组数据库中的碱基序列信息设计引物,从‘deeppurple’紫胡萝卜中克隆出dcmyb7基因(包含启动子和终止子),然后构建到pcambia1301植物表达载体上,电击转化至根癌农杆菌(agrobacterium tumefaciens) gv3101中。将含有目的基因的农杆菌侵染胡萝卜外植体,在筛选培养基上经过脱分化和再分化获得抗性植株。利用gus染色进一步确认转基因植株后,转入营养土中继续生长。待成熟以后,观察转目的基因的橙色胡萝卜肉质根各组织部位是否产生花青苷而呈紫色。
4. 研究创新点
1.本实验将通过实验验证全紫胡萝卜中其肉质根的表皮、韧皮部和木质部花青苷能否合成是否由DcMYB7单个基因控制。。
2.本项目将对胡萝卜在颜色方向上的分子设计育种,尤其是培育新的紫色胡萝卜品种,提供一套新的理论基础和指导。5. 研究计划与进展
2019.08:
从 ‘deep purple’紫胡萝卜中克隆出dcmyb7基因,构建到pcambia1301植物表达载体,将其转化到农杆菌。
2019.09-2020.04:
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