1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.研究意义
葡萄(vitis vinifera.l)是世界性重要果树,也是我国果树生产中重要的树种。葡萄作为世界上重要的鲜食果品和加工原料,果实品质在很大程度上取决于糖的种类和含量。而糖类物质的代谢及其变化情况对成熟果实的糖类组成及含量起决定作用,因此,糖分积累的过程直接影响了果实的营养价值、风味口感、色泽等品质性状[1,2],是果实发育与品质形成的关键。其中淀粉在植物体内普遍存在,是最重要的贮藏性多糖,也果实发育过程中的过渡形式、暂存形式,其合成和分解与果实的产量和品质密切相关。不仅如此,dinar and stevens[3]等还发现淀粉在果实发育早期的积累可以作为后期糖合成的储备氮源[4],因此,淀粉代谢是葡萄糖代谢的重要组成部分。而植物的任何代谢本质上都是由相关基因控制的,果实中淀粉代谢的遗传机理也是由许多基因相互作用、共同调控产生的结果。但目前,对葡萄果实淀粉积累和降解的研究仍停留在传统的化学分析阶段,仅能从现象上解释其淀粉代谢的过程,对于淀粉何时开始生成,何时降解,以及其降解的原因,是由于淀粉合成相关酶的活性减弱,还是淀粉降解相关酶活性的逐渐增强导致了这一结果,则无法从根本上解释[5-7],还需要从基因调控的角度进行充分的研究。因此,本研究对淀粉代谢关键酶及其调控基因进行表达分析与调控机理的研究,使人们进一步从分子水平上认识葡萄中淀粉代谢过程,对了解葡萄淀粉代谢调控机理,改变葡萄果实中糖的种类及含量,改善葡萄品质,以及培育高品质葡萄品种具有重大意义。
2.国内外研究现状
2. 研究的基本内容和问题
1.研究目标:
(1)验证葡萄果实中淀粉代谢途径关键酶在发育过程中活性变化是否同已有研究结论相符
(2)测定分析不同发育时期葡萄果实(果皮、果肉)以及叶片中的淀粉含量
3. 研究的方法与方案
1.研究方法:
① 淀粉代谢关键酶活性的测定 参照植物生理学的方法,并略为改进。
② 可溶性淀粉含量的测定 参照已有研究(徐昌杰等,1998)的碘显色法,并略为改进。
4. 研究创新点
本项目的创新之处
(1)在基因水平上对以往葡萄果实中淀粉代谢生理实验结论进行证明
(2)通过在基因水平上对淀粉代谢机理的研究进行进一步验证与分析,可以为深入分析酶的功能创造条件,提供相关支持和实验指导
5. 研究计划与进展
1.预期研究成果
将诚实诚信,积极完成各项实验内容,争取通过自身努力、指导老师及实验室人员的帮助,通过一系列实验手段,从分子生物学等多角度验证葡萄果实中淀粉代谢的情况及现有结论,,学会相关的科学实验方法,熟悉实验完成流程,掌握相关的专业理论知识,完成毕业论文的撰写。
2.项目研究计划及预期进展
计划时间 | 预期进展 | 相关记录 |
2013年3月中旬至5月中旬 | 1、 确定实验地点,准备试验器材 2、 查找资料,确定实验内容,确定实验方法及详细步骤 3、 查阅资料,设计引物 | |
2013年5月中旬至10月初 | 撰写开题报告,分阶段采样,采样后及时测定酶活性,淀粉含量。提取RNA,获得cDNA,进行实时荧光定量PCR实验 | |
2013年10月初至12月底 | 用相关软件进行数据分析,制作相关图表,得出实验结论 | |
2014年1月初至3月初 | 对实验结果与预期成果极不相符,或出现较大实验误差的内容进行重复,并补遗 | |
2014年3月初-5月底 | 完成实验内容,并对成熟的研究结果撰写毕业论文,随时修改,完善论文内容 | |
2014年6月初 | 提交毕业论文,进行毕业论文答辩 |
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