1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
意义:
番茄是一种喜温蔬菜,对温度反应敏感,在番茄早春育苗、定植期间的低温往往造成其生长发育受阻,严重影响成株期的生长发育,早期产量和果实的商品性。
一氧化氮(nitricoxide,no)是植物生长和发育的调节分子,能够对生物和非生物的逆境作出反应,是一种重要的生物活性分子,它对植物的种子萌发、生长发育、气孔运动、呼吸作用以及抗逆反应等生理过程均起重要的调节作用。近年来,no在植物抗逆性上的应用越来越受重视。已有大量的实验证明no参与了植物生长发育的各个方面以及植物的抗逆反应。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标:研究不同浓度的外源一氧化氮对低温胁迫下的番茄幼苗的生理影响。
拟解决的关键问题:以番茄为材料,研究外施不同浓度no对低温胁迫下番茄幼苗生长、叶片保护酶活性和氧化损伤的影响,探讨no缓解番茄低温胁迫的生理生化机理,为改善番茄低温胁迫提供理论依据,解决农业生产上番茄幼苗受到低温胁迫的问题。
研究内容:取耐低温的多毛番茄和不耐低温的番茄幼苗作为研究材料,将材料置于4摄氏度的低温胁迫环境中,分别喷施不同梯度浓度的一氧化氮后,对幼苗的叶片进行一系列的酶活性和光合指数及荧光反应测定,以筛选出能缓解番茄低温胁迫的一氧化氮最适浓度。
3. 研究的方法与方案
研究方法:稀释硝普钠一系列梯度浓度,将其分别喷施于置于低温环境的番茄幼苗表面,以缓解番茄幼苗的低温胁迫,并通过一定方法测定番茄幼苗的sod酶、pod酶、cat酶等多种抗氧化性酶活性,以判断番茄的生理状态,从而研究外源一氧化氮对低温胁迫下的番茄幼苗起缓解作用的最适浓度。
实验方案:将耐低温的la1777和不耐低温的la2706两种品种番茄幼苗健康植株分为6组,每组6株,一组置于常温下,另外5组置于4摄氏度光照培养箱中,每组番茄分别喷施一次0、0、0.05、0.1、0.2、0.4mmol/l的硝普钠,培养四天后,取每组幼苗叶片,六个处理,每组三个重复,测定幼苗的sod酶、pod酶、cat酶等酶活性以及过氧化氢含量,从而筛选出最适的一氧化氮浓度。其中,sod酶活性的测定方法是依据超氧物歧化酶抑制氮蓝(nbt)在光下的还原作用来确定酶活性大小;pod酶用愈创木酚法测定,即利用过氧化氢酶催化过氧化氢氧化酚类的反应,产物为醌类化合物的原理,因为醌类化合物会进一步缩合产生颜色较深的化合物,测定反应液的吸光值即可求酶活性大小;cat酶的活性测定是利用紫外吸收法,原理为过氧化氢在240nm波长下有强烈吸收,过氧化氢酶能分解过氧化氢,使反应溶液吸光度随反应时间而降低。
技术路线:
4. 研究创新点
特色或创新之处:
在课题立意上来看,目前对no的研究多集中在对盐胁迫和干旱胁迫的作用上,对低温胁迫的涉及较少,所以此研究课题比较新颖。
在发展前景上来看,番茄很容易受到低温胁迫,在寒冷季节很容易因为低温胁迫导致产量低成本高,本课题有利于解决这类问题,为解决这个问题提供理论依据。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展:
五月上旬至中旬:预实验以及番茄的育种;
五月底:实验所需的药品试剂以及设备的检查与准备;
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