OsHAK5影响水稻株型机理的探讨开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

钾(k)是植物中最为丰富的阳离子，大约占植物干重的4-10%。

k离子是主要的渗透调节物质，调控植物细胞膨压 (tsay et al., 2011)，膜电位并且能撷抗盐土na离子的毒害(dolan et al.,2013)。

作物缺k和钠 (na)毒害（盐害）两者均是限制全球农作物生产的重要因素。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标　　明确钾离子转运体基因oshak5不仅与水稻中k 的吸收有关，而且通过调控生长素转运体基因的表达和(或)改变生长素在体内的转运、再分配以及独角金内酯水平影响水稻的根系形态和分蘖数、高度等株型，为创制理想株型的水稻提供一种新的技术途径提供理论基础。

我们已有了oshak5基因突变体的水稻，同时我们也培育了这个基因超表达的水稻。

我们已有的结果显示，这个基因在环境低钾时 有利于水稻k素的吸收。

3. 研究的方法与方案

检测oshak5在组织和亚细胞细胞结构上的定位。

细胞定位：　　　　将绿色荧光蛋白（gfp）的基因构建在n-端或c-端的oshak5基因上，将此融合的基因通过农杆菌临时（transiently）表达在洋葱表皮细胞上。

二天后用共聚焦显微镜检测此蛋白在洋葱细胞上的表达，我们将用细胞质膜选择性蛋白fm4-64fx荧光染料做对照以确定是否在质膜表达。

4. 研究创新点

南京农业大学大学资源与环境科学学院植物营养分子遗传实验室已经建立了：　　　(1) 成熟的水稻转基因技术体系， (2) 成熟的水稻栽培、营养生理分析条件和经验，(3) 成熟的水稻分子生物学分析技术和经验。

　　　此外，我的导师余玲教授长期从事钾离子、钠离子通道和转运研究，有较好的蛋白质生物化学和细胞内囊泡转运的研究经验。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展2014.2-2014.3 完成生长素家族基因的表达以及独脚金内酯相关基因的表达2014.3-2014.4 完成OsHAK5的亚细胞定位和组织定位2014.4-2014.5 完成植株体内的生长素含量和独脚金内酯含量的测定