CmFTL1基因在日中性菊花‘优香’成花过程中的功能研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.1课题意义菊花是菊科菊属多年生宿根草本花卉，原产于中国，现在在世界各国广泛栽培，是我国十大传统名花和世界四大切花之一。

近年来，切花菊已成为我国主要出口创汇花卉，但多数菊花品种花期集中于秋季，属典型的短日照植物，虽可通过光温调节实现周年生产，但反季节生产的成本很高，严重制约产业健康发展。

解决这一问题的关键在于破解菊花对光周期条件的依赖难题，以培育出更多日中性菊花新品种，因此，亟待开展菊花开花分子机理的研究。

2. 研究的基本内容和问题

2.1研究目标（1）对日中性菊花品种优香进行转基因，得到pbig-cmftl1转基因植株；（2）获得pbig-cmftl1超表达转基因菊花阳性植株，以研究cmftl1基因在日中性菊花优香成花过程中的功能。

2.2研究内容（1）对日中性菊花品种优香进行转基因，获得pbig-cmftl1转基因植株；（2）通过rt-pcr技术对转基因苗进行检测并进行成活率统计；（3）转基因阳性苗以及未转基因同品种菊花苗（ck）的扩繁及生根培养；（4）对培育出的转基因菊花苗及ck进行观察并分别记录菊花的开花天数和叶片数；（5）分析cmftl1基因在日中性菊花优香成花过程中的功能。

2.3拟解决的关键问题（1）本实验所需要的实验材料需由指导老师实验室提供；（2）田间观察可在指导老师试验田中进行；（3）转基因的转化率高低很大程度决定了实验的成败，这既与实验中所用的转基因载体有关，也与实际的实验操作有关；（4）指导老师实验室容纳了众多研究生。

3. 研究的方法与方案

3.1研究方法目前实验室在转基因花卉的组织培养，已经建立起了相应的技术体系，这些技术对于本项目中菊花cmftl1的转基因研究打下了坚定的基础。

3.2技术路线于基地采菊花品种优香→优香组培体系的建立→农杆菌叶盘法转化菊花→转基因苗组织培养及生根培养→对转基因株系提取dna，运用荧光定量rt-pcr检测获得阳性株系，并将阳性苗及未转基因同品种菊花苗（ck）扩繁后移栽于基地大田→培育出的转基因菊花苗及ck进行观察并分别记录菊花的开花天数和叶片数→分析cmftl1基因在日中性菊花优香成花过程中的功能3.3实验方案3.3.1材料（1）实验用菊花材料优香来自南京农业大学菊花种质资源保存基地；（2）南京农业大学园艺学院菊花遗传育种实验室已同源克隆了菊花cmftl1基因，并且构建了植物超表达载体pbig-cmftl1。

3.3.2培养条件菊花组培苗优香的培养温度为25 2℃, 光照条件为12 hd-1，36 mmolm-2s-1。

4. 研究创新点

已有报道表明在秋菊神马中组成型表达csftl1能够引起微弱的早花现象，推测其可能是长日照下的开花素(higuchi et al. 2013)。

但这与日中性菊花开花过程中cmftl1基因的作用是否相同，并不清楚。

本研究拟对cmftl1基因在日中性菊花优香成花过程中的功能进行研究，通过农杆菌介导把cmftl1转入日中性菊花优香，以研究cmftl1基因在日中性菊花优香成花过程中的功能。

5. 研究计划与进展

2014.7至2014.8获得日中性菊花优香组培苗；2014.9至2014.12农杆菌叶盘法转化优香，并进行继代培养和生根培养；2015.1至2015.2对转基因株系提取DNA并检测，阳性苗进行扩繁；2015.2至2015.4阳性苗的炼苗，移栽大田种植并观察；2015.4 撰写论文。