建兰离体培养和快速繁殖开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

本课题的意义建兰（学名：Cymbidium ensifolium (L. ) Sw.）建兰是指主花形在盛夏金秋的中国地生根兰花。植物学界以其主产地福建而为名。属于国兰的一大种群。其花浅黄绿色，芳香。与其它种类国兰不同的是，其花期较长且可多次开花（一年可达六次），故又名四季兰。 建兰的传统繁殖为分株繁殖，该方式繁殖速度慢，且环境条件要求较高。而离体培养和无菌快繁技术可以解决分株繁殖速度慢量小环境要求高的问题。

国内外研究概况建兰产中国多地，属国兰。深受海内外认识的喜爱。但因兰科植物的传统繁殖系数低，产量有限，成本高。随着中国经济的发展和科学技术的提高，开始进行兰科植物的离体组织大快繁研究。应用前景随着现代生物技术的发展，以组织培养为主要手段的生物技术逐步应用到建兰的繁殖过程中，大幅度的提高了建兰的繁殖系数。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标根据对建兰的认识和了解以及项目组通过研究兰科兰属的普通育种所构建的技术平台上，采用无菌播种及快速繁殖技术建立建兰的最适培养技术体系。

项目研究内容 1）研究无菌系的快速繁殖条件明确适宜的培养基以建兰的不同组织或器官为外植体建立组织培养的方法，获得的植株与改变不同营养液成分或其他条件但保持单一变量的原则培养出来的植株为对照，比较两种方法所得到植株的差异，其中包括生长时间，幼苗的形态学等；并分析比较两种方法的优缺点。

拟解决的关键问题 1）通过调节培养基的配方等确定建兰的最适的培养基。

3. 研究的方法与方案

研究方法 1）对无菌材料离体快速繁殖筛选最适培养条件以建兰的组织或器官为外植体进行离体培养获得无菌系，并通过比较不同培养基成分或其他培养条件对无菌系进行增殖；参照张淑娟等（2002）的快速繁殖方法，比较两种方法所获得植株的差异，其中包括生长时间，幼苗的形态学等；并分析比较两种方法的优缺点。

技术路线建兰---花茎及子房等组织培养---愈伤组织及不定芽的诱导继代扩增及移栽---花盆中得到成熟植株---通过快繁技术得到植株分析建兰的最适培养基实验方案（1）无菌材料获取选取建兰成熟果荚，表面灭菌后在离体条件下取出种子播种与无菌萌发培养基上，并选取健壮无病新芽，自来水冲洗干净，在超净工作台上剥去外层叶片，用70％酒精浸泡30s，再用1％次氯酸钠消毒10min，无菌水冲洗数次，最后用0．1％hgcl2(加3滴吐温80)消毒8 min，无菌水冲洗数次。

小心剥去包叶，掰下腋芽，切去茎尖基部伤口褐变部分，切成2～5mm长的芽，再接种到诱导培养基上。

4. 研究创新点

采用不同外植体进行建兰的离体培养及无菌快速繁殖技术研究以建立适宜的离体培养及快速繁殖体系。

5. 研究计划与进展

研究计划 2014年5月~2015年1月：诱导不定芽与继代培养直到移栽。

2015年1月~2015年4月： 无菌苗驯化移栽。

结果整理及论文撰写。