1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.意义及目的 本实验结合部分高硒地区及富硒过程中造成硒毒害现象出发,研究较高浓度的硒对植物生长的抑制作用,探讨植物受硒毒害过程中的信号传递分子的变化,试图发现no、h2s在硒毒害植物过程中的作用,最终发现高浓度硒对植物毒害作用机理。
为现实生产过程中解决植物富硒障碍提供有力的科学依据。
2.国内外研究概况2.1 植物中的硒研究进展 在生物体内硒主要以无机态和有机态存在,而且植物硒具有较高的生物利用度和生物活性,而且植物硒在硒生态链中起着不可或缺的作用[1]。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标、内容和拟解决的关键问题 本实验以小白菜(brassica rapa chinensis)为材料,通过不同浓度亚硒酸钠处理,观察表型以及内源no、h2s变化情况,初步确定硒通过调控no、h2s诱导小白菜产生氧化损伤。
然后通过对h2s的内源清除和外源添加和抑制产生活性氧的nadph氧化酶观察表型与内源h2s变化确定h2s在硒诱导小白菜氧化损伤信号通路中的作用,最后从基因层面研究硒如何通过编码nadph氧化酶的rboh基因造成植物受到氧化损伤。
最终得到硒通过调控小白菜中内源h2s影响rboh基因表达使小白菜中活性氧升高造成氧化损伤的结果。
3. 研究的方法与方案
研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析1. 研究方法和手段1)培养方法:小白菜种子用1.0%NaClO消毒10min,漂洗后在黑暗中催芽24h,挑选萌发一致的幼苗进行处理;2)荧光染色测定:用H2S荧光探针检测小白菜中H2S含量;3)用RT-PCR的方法扩增与编码NADPH氧化酶的RBOH基因,检测不同处理的表达水平;2. 研究材料小白菜(Brassica rapa chinensis)(绿领五月慢)。
3.技术路线见附件
4. 研究创新点
硒元素对人体健康有着重要的作用,但在当今社会还不够被重视。
人体自身不能合成硒,食物中的硒才是主要来源,硒主要存在于天然食物中,海鲜以及植物种子,尤其是芝麻子中含有大量的硒。
大多数抗氧化营养增补剂中也含有硒。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展2012年9月-2013年4月 查阅相关文献,完成实验设计并掌握相关实验技术;2012年5月-2013年9月 完成预备实验并确定实验方案;2013年5月-2013年8月 完成硒通过H2S抑制青菜生长的表型实验;2013年9月-2013年12月 完成硒通过H2S抑制青菜生长的信号通路的分析与研究;2014年1月-2014年12月 探究H2S在硒诱导氧化损伤信号途径中的作用;2015年1月 -2015年6月 整理数据,撰写论文并完成答辩;
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