1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
萝卜(raphanus sativus l.)为十字花科萝卜属一、二年生草本植物,又名土酥、温菘、莱菔,以肥大的肉质根为产品器官。萝卜起源于东亚,中国作为萝卜的起源地之一,种质资源丰富,栽培面积大,在我国的播种面积仅次于大白菜,营养丰富,是我国的重要蔬菜作物。
萝卜小孢子培养获得的单倍体材料,每一种基因都只有一个,加倍后可获得基因型纯合的双单倍体纯合系,可极大地缩短育种周期。人工获得单倍体材料的途径有种间远缘授粉诱导孤雌生殖单倍体;化学药物诱导孤雌生殖获得单倍体;未授粉子房和胚珠培养;花药培养和游离小孢子培养等。其中游离小孢子培养近些年来成为单倍体育种的研究热点。多倍体在自然界中很常见,人工诱导获得的多倍体可以创造新的种质资源,而且由于其染色体倍数的增加,可以做为亲本提高远缘物种间的可杂交性,此外多倍体拥有比二倍体更优越的农艺学特征,如四倍体拥有更大的叶子和花器官,叶片宽与长比更大,生长更健壮,对环境的忍耐力和抗逆性更强等,这也改善了蔬菜的品质和产量。人工获得多倍体材料主要通过物理方法,化学方法,组织培养结合化学诱导,组织培养无性系克隆变异和体细胞杂交法等。
目前利用秋水仙素进行萝卜四倍体诱导的研究已有报道,但四倍体诱导率低,且应用于实际生产很少。自从blankeslee和avery(1937)报道了用秋水仙素诱导曼陀罗多倍体获得成功之后,多倍体育种得到了广泛的应用。张纪增和赵德培(1976-1984)也进行了萝卜多倍体育种的研究。利用秋水仙素诱导四倍体的研究已在白菜(刘惠吉等,1990),黄瓜(陈劲枫等,2004)等蔬菜上见报道。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标
多倍体育种(polyploid breeding) 利用人工诱变或自然变异等,通过细胞染色体组加倍获得多倍体育种材料,用以选育符合人们需要的优良品种。本实验利用秋水仙素处理萌发的幼苗,即两叶一心时,能抑制正分裂细胞的纺垂体的形成,导致染色体不能移向细胞两极,从而使染色体倍数增加。如果这种细胞维持原状,继续分裂,就形成多倍体组织。
研究内容
3. 研究的方法与方案
研究方法
1小孢子培养
2同源四倍体研究
4. 研究创新点
萝卜倍性育种种质创新
萝卜游离小孢子培养是单倍体育种的一种。由于单倍体材料每一种基因都只有一个,加倍后可获得基因型纯合的双单倍体纯合系,可极大地缩短育种周期,从而提高育种效率,而且小孢子培养还可以用于突变体的筛选和基因转化,获得的双单倍体群体是分子标记和基因图谱的理想材料。多倍体材料由于器官的巨大性,而拥有比二倍体更优越的农艺学特征,如四倍体拥有更大的叶子和花器官,叶片宽与长比更大,生长更健壮,对环境的忍耐力和抗逆性更强等,这也改善了蔬菜的品质和产量。此外,多倍体材料由于其染色体数目的增加,可以做为亲本提高远缘物种间的可杂交性。利用秋水仙素诱导萝卜同源四倍体,比较二倍体和四倍体萝卜的特征特性,旨在提高同源四倍体的诱导率,完善鉴定体系,为萝卜同源四倍体种质创制奠定技术基础。
5. 研究计划与进展
进度安排
2014.5-2015.5 春季期间,进行小孢子培养试验
2014.9-2014.12 同源四倍体诱导试验
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