1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
梨是我国第三大水果,其在农业经济中占有重要地位,是我国许多农村的重要支柱产业。
近年来,我国梨产业发展迅速,至2011年,栽培总面积已达113.18万公顷,总产量为1594.51 万吨,分别占世界梨树总面积和总产量的70%和66%以上,在世界梨产业中占有举足轻重的地位(fao,2013年数据)。
同时梨果生产目标也逐步从数量型向以提升果实品质为重点的质量型转化。
2. 研究的基本内容和问题
1.研究目标:本项目是针对我国砀山酥梨等主栽梨品种的石细胞含量高、风味品质差,导致市场竞争力弱,销售价格低等问题提出的。
在已开展梨果实石细胞生理学研究的基础上,应用现代组学技术手段,获得c3h基因全长,及其相关的生物学信息,为阐明c3h在梨果实石细胞g/s木质素合成中的功能、梨果实品质的调控提供重要的科学依据,也为实现梨果实性状的定向遗传改良提供基因资源,课题具有重要的科学理论价值和潜在应用前景。
2.研究内容:本项目以石细胞较多、肉质粗糙的砀山酥梨为试验材料,在已开展的梨果实石细胞生理学研究基础上,采用定量pcr技术,对c3h基因进行克隆和分析,从而为梨果实木质素形成的分子机制研究提供依据,为开展果实品质性状的定向改良提供基因资源。
3. 研究的方法与方案
1.研究方法:将提取的c3h的mrna,依赖反转录酶反转录成cdna,运用pcr扩增方法体外扩增cdna,检测定量扩增的产物,分析c3h基因在梨果实发育不同时期的表达情况。
2.技术路线:不同发育时期梨果品的采集→提取、纯化c3h的mrna→将mrna反转录成cdna→体外pcr扩增→pcr定量鉴定分析3.可行性分析3.1 实验材料可靠:在南京农业大学园艺试验站有梨品种200多个,有相关品种(品系)可供采样,为本项目样品的采集及田间的验证试验提供了便利条件。
3.2 技术路线合理:该项目的提出建立在指导教师在对梨树石细胞长期研究的基础之上,本项目切入点准确,思路成熟,具备良好的技术储备。
4. 研究创新点
此选题来自产业发展需求和生产实践。
本项目是针对我国砀山酥梨等主栽梨品种的石细胞含量高、风味品质差,导致市场竞争力弱,销售价格低等问题提出的,在已开展梨果实石细胞生理学研究的基础上,拟深入研究其分子机制,为完善梨果实木质素形成机制的理论,以及生产上最终解决梨果实石细胞较多的问题提供科学依据。
此实验项目挖掘出控制梨果实木质素合成的关键基因,揭示关键基因的功能及其互作调控网络。
5. 研究计划与进展
2013.52013.11 实验材料的准备:提取不同发育时期的砀山酥梨中C3H的DNA和mRNA,分类保存2013.122014.10 将mDNA反转录成cDNA,进行PCR扩增和定量PCR鉴定2014.112015.5 全面总结项目进展,进行以上相关研究的补遗,分析C3H基因在梨果石发育不同时期的表达情况;处理数据,撰写论文等
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