低钾条件下HtNHX1与 HtNHX2基因超表达的水稻抗盐性差异的比较开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

应用前景及意义：对于拥有13亿人口的中国而言．粮食始终是头等大事。

随着人口持续增加，粮食不断减少．大力发展转基因粮食品种对我国来说无疑是解决僧多粥少现状的大好途径。

粮食安全问题对于中国来说尤为重要。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标： 本课题组前期从耐盐菊芋中克隆了两个液泡上定位的钠（钾）氢逆向转运蛋白htnhx1和htnhx2同源基因，并发现它们对水稻耐盐和耐贫瘠上存在差异。

研究目的主要是探究htnhx1/2影响水稻耐盐差异的机理，比较了高盐，贫瘠或低钾胁迫下htnhx1或htnhx2对转基因水稻生长和产量的影响，并初步明确了这两个基因对水稻体内钾，钠的积累存在明显差异，htnhx2更有利于水稻低钾情况下的抗盐。

并将这两个基因转到高产水稻武育粳中，期望能应用到生产上。

3. 研究的方法与方案

研究方法：1、 htnhx1和htnhx2 转基因水稻在盐胁迫下对水稻产量的影响利用其他物种已经验证过功能的nhx基因，以及菊芋现有的est数据库，通过电子克隆、genome walking等分子手段克隆获的htnhx1和htnhx2基因；将已验证与耐盐相关的基因构建植物表达载体转到模式水稻植物日本晴中（上届师姐已经完成）。

但是只做了苗期水培耐盐实验，没有全生育期的盐处理实验。

盐处理实验如下：植物长到抽穗期，开始灌盐。

4. 研究创新点

我们的HtNHX1和HtNHX2是自主克隆到的能极其显著提高水稻抗盐功效的NHX家族植物新基因，其中HtNHX2的抗盐功能及其显著。

拟南芥的AtNHX1的活性调节机理已有所报道，应为我们的HtNHX1,HtNHX2 的序列和拟南芥AtNHX1的序列还有差异，通过比较它们的亚细胞定位和不同的互作蛋白有利于阐明HtNHX1和HtNHX2的抗盐机理。

5. 研究计划与进展

研究计划2015.03-2015.04文献查阅，将28,47的c端和n端接上flag；扩出htvhac1基因2015.04-2015.06htvhac1基因的c端和n端接上his.构建atnhx表达载体，培育水稻愈伤组织，将含有atnhx和28,47农杆菌转到武育粳愈伤中。

将日本晴的28,47，wt种子发苗，盐处理，缺钾处理，贫瘠处理，营养液梯度处理。

统计不同处理下28,47，wt的农艺性状，并测定水稻不同部位na，k含量。