甜味蛋白基因Brazzein在森林草莓中的遗传转化研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

课题意义 草莓富含氨基酸、果糖、蔗糖、葡萄糖、柠檬酸、苹果酸、果胶、胡萝卜素、维生素b1、b2、烟酸及矿物质钙、镁、磷、钾、铁等，这些营养素对生长发育有很好的促进作用，对老人、儿童大有裨益。

同时，国外学者研究发现，草莓中的有效成分，可抑制癌肿的生长。

每百克草莓含维生素c50-100毫克，比苹果、葡萄高10倍以上。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标获得20株以上转化株系；测定转化后的森林草莓果实的甜度、可溶性糖、可溶性蛋白、Vc等营养品质指标研究内容 利用农杆菌转化的方法，将草莓果实特异启动子驱动的甜味基因Brazzein导入森林草莓，创造出有甜味蛋白的森林草莓新品种。

拟解决的关键问题草莓果实特异启动子的寻找；侵染外植体的选择；表达载体的构建；转化的成功率。

3. 研究的方法与方案

研究方法制定试验方案：查阅相关研究方案，进行实验设计；试验研究：按照试验方案进行试验研究；对试验结果进行分析：通过对试验数据的分析证明此研究方向的可行性和重大意义。

技术路线(详见附件)实验方案找寻果实特异启动子→载体构建→转农杆菌→配培养基→侵染外植体→筛选→收获→测定可行性分析近年来，生物技术的发展为开发利用甜味蛋白提供了有效手段，集中体现于以下方面：①利用 x射线衍射技术、氨基酸测序及计算机辅助分析甜蛋白的构象特点，按需借助蛋白质工程技术重新设计合成甜蛋白；②应用基因工程技术分离提取植物细胞甜蛋白 cdna；③通过人工合成甜蛋白基因及体菌的表达、鉴定扩增生产甜味蛋白；④借助基因工程技术将甜蛋白基因转入其他作物表达。

另外：实验室设备条件完善，趋近世界顶尖水平，导师及师兄师姐专业性强，能解决许多问题。

4. 研究创新点

特色及创新之处 本课题利用农杆菌转化的方法，第一次将草莓果实特异启动子驱动的甜味基因Brazzein导入森林草莓，创造出有甜味蛋白的森林草莓新品种，增加了森林草莓品种的多样性。

5. 研究计划与进展

研究计划2015.04 购森林草莓种子、催芽2015.06 完成载体构建2015.09-2016.03草莓转基因尝试及protocol优化2016.04-2016.06获得再生植株2016.05 撰写论文2016.06 修改论文，答辩预期进展成功获得转化株系甜味蛋白的导入引起的甜味表型显著变化