花烛AaDFR基因对矮牵牛的遗传转化研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.1 本课题的意义及应用前景矮牵牛(petuniahybrida)又名碧冬茄、矮喇叭、灵芝牡丹、毽子花、洋牡丹，是茄科碧冬茄属的多年生草本植物。

自从1803年jusseau确定了矮牵牛属以来，矮牵牛属大约有40种植物 1。

因其花朵硕大，色彩丰富，花型多样，花期较长，成为重要的花坛和盆栽用花，市场需求越来越大 2。

2. 研究的基本内容和问题

2.1 研究目标为了分析在单子叶植物花烛中克隆的dfr基因能否在双子叶植物矮牵牛中表达，以研究对花色改变的影响。

2.2 研究内容1)矮牵牛再生体系的优化;2)农杆菌介导的转化;3)转基因植株的鉴定和性状分析。

2.3 拟解决的关键问题通过优化转化条件，对多个矮牵牛株系进行转化,获得多个转化植株，由不同颜色的转基因植株，筛选出抗性植株，分析基因功能。

3. 研究的方法与方案

3.1 研究方法通过农杆菌介导的遗传转化，pcr扩增等方法进行转基因植株鉴定。

3.2 实验方案3.2.1 矮牵牛再生体系优化比较不同浓度细胞分裂素对叶片再生的影响0.5 1.0 1.5 2.0 mg/l不同潮霉素筛选浓度的确定5 10 15 20 mg/l3.2.2 农杆菌转化农杆菌培养（培养基，条件，收集菌体...）转化，农杆菌和叶片共培养，比较共培养时间，（24h 48h 72h 不能太久）超声波处理、真空处理等促进转化3.2.3 转基因植株鉴定pcr扩增，（步骤）rtpcr检测 提取mrna转cdna3.2.4 转化植株性状鉴定转化植株移栽到温室，鉴定花色的变化及花青素含量的变化3.3 可行性分析 矮牵牛植株再生容易，遗传背景清楚，且花器官较大，是进行遗传转化研究植物花色变化的模式植物。

转烟草等对花色影响已有较多报道

4. 研究创新点

从花烛中克隆DRF基因转化到矮牵牛中，分析单子叶植物中控制花青素合成的基因在双子叶植物中的表达，这是此前尚未见报道的。

通过将花烛中DFR基因转入矮牵牛植株中，获得矮牵牛新种质。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展5.1研究计划2015.4中旬 查阅资料2015.5-2015.6 总结文献，制定计划，提交开题报告和文献综述2015.6-2015.7 矮牵牛再生体系的优化2015.9-2015.12 转化、筛选、鉴定2016.1-2016.6转化植株性状分析5.2 预期研究成果将红掌AaDFR基因转入矮牵牛，并初步分析其表达特征，获得种质资源新材料。