1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1本课题研究意义 血红素加氧酶(ho)在动物体中具备优秀的抗炎与抗氧化作用,其作用机理能够在医学领域发挥重要作用,对于治疗疾病延缓衰老增加人类的平均寿命有巨大的作用,尤其是解决抗生素的滥用现象,现在人们过度依赖抗生素导致产生了对此无效的超级细菌,一旦超级细菌散播开来将会产生非常可怕的后果。
ho在植物体中起到调控植物的生理活动的作用,通过控制光敏色素生色团的合成来控制自身的生长进程[1]。
然而ho在微生物中的作用尚不清楚,甚至与动植物相比研究数量也非常稀少。
2. 研究的基本内容和问题
1研究目标 在本课题研究中,了解ho的具体作用机制及其对灵芝表型的影响。
探讨ho对灵芝热胁迫的缓解机制发现。
高温灾害性气候是影响灵芝产量的一种主要非生物胁迫,严重影响灵芝的优质高产,是导致低温型食用菌产量和品质下降的重要因素。
3. 研究的方法与方案
研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析1研究方法1.1基因克隆基因克隆是指在体外将含有目的基因或其它有意义的dna片段同能够自我复制的载体dna连接,然后将其转入宿主细胞或受体生物进行表达或进一步研究的分子操作的过程,因此dna克隆又称分子克隆,基因操作或重组dna技术。
1.2rna干扰技术rna干扰是指在进化过程中高度保守的、由双链rna诱发的、同源mrna高效特异性降解的现象。
基因沉默,主要有转录前水平的基因沉默(tgs)和转录后水平的基因沉默(ptgs)两类:tgs是指由于dna修饰或染色体异染色质化等原因使基因不能正常转录;ptgs是启动了细胞质内靶mrna序列特异性的降解机制。
4. 研究创新点
关于ho的研究还局限在动植物领域中,在微生物领域中ho相关的发表文章少之又少,本课题突破性的选取灵芝研究其中ho中的基因表达以及在热胁迫中的功能,开辟出ho研究的新方向。
如果取得成果,不仅加深了对ho的了解,而且关于灵芝的培育、营养价值利用有很大帮助。
热胁迫条件下的功能研究有助于灵芝面临恶劣天气尤其是高温条件时采取应对措施,灵芝是一种珍贵的药品,但是人工培育的产量不高,菇农们仍面对高风险的不稳定因素,能够了解热胁迫下ho的功能,会对提高灵芝产量起到帮助。
5. 研究计划与进展
2016年10月 基因克隆2016年11月 沉默菌株获得2017年1月-2月 验证沉默效率2017年3月 蛋白质纯化并验证2017年4月 测定血红素加氧酶活性
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