1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1) 课题意义:在开花植物中,花粉的萌发及花粉管的生长对雄配子体的传递具有重要影响。
花粉管的生长为极性顶端生长,为满足尖端的快速生长,花粉管需要不断合成新的膜物质及细胞壁组分,这一过程中,高尔基体分泌囊泡将细胞壁前体物质运送至花粉管尖端,并通过胞吞作用回收细胞质膜上多余的膜结构。
研究发现,cog8在其中发挥重要作用。
2. 研究的基本内容和问题
1) 研究目标确定cog8和cogip1的互作,并探究两者的相互作用对花粉管生长有何意义。
2) 研究内容进一步确定cog8和cogip1两者之间的相互作用。
对cogip1突变体植株进行遗传分析,确定cogip1突变对花粉的雄配子体发育是否有影响;观察cogip1突变体的花粉表型是否异常,并做统计分析;观察突变体花粉中高尔基体形态是否异常。
3. 研究的方法与方案
1) 研究方法用酵母双杂、bifc等方法进一步确定cog8与cogip1互作。
构建cogip1的回补质粒,经由农杆菌导入cogip1突变体植株中后,观察表型是否回复到野生型。
提取cogip1突变体植株后代的dna,并设计引物验证后代中突变体与野生型的比例,确定cogip1对花粉的雄配子体发育是否有影响。
4. 研究创新点
通过探究COG8与COGIP1互作的生理意义来揭示花粉管顶端极性生长的分子机理。
5. 研究计划与进展
2017.09-10:完成cogip1突变体植株的遗传分析,及突变体花粉表型的鉴定2017.10-12:完成回补质粒的构建,转化农杆菌并侵染突变体植株。
2017.12-2018.01:构建ad-cogip1质粒,进行酵母双杂实验;完成bifc。
2018.03-04:观察回补后表型;观察cogip1突变对cog8定位的影响。
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