水稻OsHIPP53基因功能的初步研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

一、意义本课题旨在对水稻oshipp53的功能进行初步探究，通过原生质体的瞬时表达对oshipp53表达产物进行定位，并且构建相关表达载体将oshipp53导入酵母中，探究oshipp53是否能结合其他重金属离子，并且通过荧光定量分析实验探究oshipp53是否受该金属离子的诱导，最终探究oshipp53是否对某类重金属离子的毒害起到缓解作用。

相关研究表明，重金属离子在土壤中不能被微生物所降解，故其在土壤中的残留时间长、残留率高，可在水稻根、茎、叶和籽粒中大量积累，影响水稻种子的萌发、各器官的生长发育和食用品质[1]。

甚至，重金属离子可通过作物进入食物链，严重危及人类的健康[2]。

2. 研究的基本内容和问题

一、研究目标（1）对oshipp53表达产物进行定位。

（2）探究oshipp53是否能结合某类重金属离子并且是否受该金属离子的诱导。

二、研究内容（1） oshipp53表达产物的定位通过原生质体的瞬时表达实验对oshipp53表达产物进行定位。

3. 研究的方法与方案

一、研究方法以及实验方案（1） oshipp53表达产物的定位1oshipp53的扩增选用粳稻品种日本晴，培养一周后选取根茎部分，提取rna，逆转录得cdna,此为对oshipp53进行pcr扩增的模板。

对oshipp53进行pcr扩增选用50ul体系：1ul模板，正负引物各1ul，mix buffer 25ul，无菌水23ul。

2构建表达载体本次连接采用10ul体系：重组酶2.5ul，pxzp008载体3.5ul，oshipp53 pcr扩增产物4ul，55℃水浴15min。

4. 研究创新点

虽然国外研究人员对HIPP基因家族的部分基因的功能展开了相关探究，其功能主要表现在参与镉的解毒作用、植物-病原体的相互作用以及水杨酸依赖的植物免疫途径。

但是查阅大量文献后发现，目前为止国内外并无相关人员开展对OsHIPP53的研究，本课题旨在对水稻中 OsHIPP53基因功能进行初步探索，为HIPP基因家族功能的进一步探究奠定基础。

5. 研究计划与进展

2017.10-2018.02 通过原生质体的瞬时表达实验完成oshipp53表达产物的定位。

2018.03-2018.04 构建相关表达载体将oshipp53导入酵母中，探究oshipp53是否能结合其他重金属离子。

2018.04-2018.05 通过荧光定量分析实验探究oshipp53是否受该重金属离子的诱导。