1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1、本课题的意义梨是世界上最重要的温带果树之一,其种质资源丰富,分布范围较广。
但是由于种间的杂交亲和性造成了梨品种资源间复杂的遗传组成关系,难以通过有限的表观性状对资源进行合理评价和利用。
中国西南部地区有丰富的野生动植物资源,是全球遗传多样性的研究热点[1],在那里(四川、云南和西藏的交界地区),有学者发现有一些适应性极强的梨的地方种,统称为藏梨。
2. 研究的基本内容和问题
1、研究的目标了解研究材料的遗传多样性及它们之间的亲缘关系2、研究的内容以我国西南藏区的藏梨为材料,主要研究内容包括:(1)基于核基因SSR的藏梨遗传多样性评价;(2)藏梨与砂梨、秋子梨的亲缘关系;(3)藏梨的起源和传播分析。
3、拟解决的关键问题探究清楚藏梨的遗传多样性,研究其与其他种之间的亲缘关系,并发现藏梨特有的标记位点,为寻找抗性相关基因奠定基础,对梨的抗性育种具有重大意义。
3. 研究的方法与方案
1、技术路线 植物材料的采集与保存 ↓ dna提取与质量检测 ↓ ssr标记的选择 ↓pcr扩增及聚丙烯酰胺凝胶电泳 ↓ 梨遗传多样性统计与聚类分析2、实验方案(1)材料采集与保存:本试验共选用67份试验材料,其中藏梨29份,砂梨38份,秋子梨8份。
29份藏梨品种采自西南藏区,38份砂梨和8份秋子梨采自南京农业大学江浦梨资源圃和武汉国家梨资源圃。
于春天采集多份梨种质资源的幼嫩叶片,经液氮速冻后冷藏于-80℃冰箱;(2)dna提取与质量检测:植物基因组的提取利用forgene plant dna isolation kit,操作步骤如下:1)取600ul pl1于2ml离心管中,加入20ul foregene protease,2ul 巯基乙醇,混匀后置于65℃水浴锅中预热。
4. 研究创新点
(1)利用核心SSR标记全面分析了藏梨品种资源的遗传多样性,揭示了藏梨群体的起源和传播过程。
(2)对藏梨的遗传标记研究有助于为梨的育种提供宝贵的种质资源,对未来梨的抗性育种等具有巨大意义。
5. 研究计划与进展
(1)2017.03前搜集查阅相关文献,制定试验计划,落实试验材料和方案(2)2017.04 2017.09提取植物材料的DNA并对其做质量检测,对所提取的DNA进行PCR扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳,观察条带,保存试验结果(3)2017.10 2018.02试验数据汇总及分析(4)2018.03 2018.05根据试验数据,参考相关文献,撰写论文
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