海藻糖-6-磷酸合酶基因的鉴定及功能分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

荷花是我国十大名花之一，同时荷花也是多年生水生花卉。

荷花分布范围极广，遍及全国各地，在我国的栽培历史悠久，文化底蕴深厚，具有很高的观赏价值、经济价值和文化价值。

目前有三种莲种系，分别是中国莲、中美杂种莲和中国莲亚种莲。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标1) 获得荷花候选nntpss基因家族成员全长cdna，明确其表达特性；2) 在烟草中过表达候选基因鉴定其功能。

研究内容本实验拟从荷花中克隆候选海藻糖-6-磷酸合酶基因（nntpss），并对其转录本进行比较分析；通过pcr技术对其表达模式进行分析；通过转基因技术在烟草中过表达四，进一步阐述nntpss在弱光诱导的荷花花芽败育中的功能，为解决弱光下荷花花芽易败育、无法开花的问题提供思路，为耐阴荷花新品种的分子创制奠定基础，主要研究内容如下：1) 克隆海藻糖-6-磷酸合酶基因nntpss：实验材料为荷花品种红荷。

根据基因组注释的nntpss序列为模板设计引物，依次进行引物设计、rt-pcr扩增、测序获得基因序列。

3. 研究的方法与方案

有关方法和实验手段1) nntpss基因的鉴定及序列分析 从数据库中下载荷花的基因组（https://www.genomevolution.org/coge/）和tpp/tps的hmm model（http://pfam.xfam.org/）。

使用markov model程序从荷花蛋白数据库中鉴定荷花tps基因。

利用在线服务器gsds（gsds; http://gsds.cbi.pku.edu.cn/）输入基因model，绘制tps基因的基因结构。

4. 研究创新点

本研究首次对弱光导致荷花花芽败育、无法正常开花的机理进行研究，探讨荷花NnTPSs基因在弱光诱导的荷花花芽败育中的功能与作用机理。

5. 研究计划与进展

研究计划1) 荷花nntpss基因家族成员及其启动子的克隆、生物信息学分析；nntpss在不同遮阴处理下的表达特性分析。

2) 构建nntpss植物超表达并转化烟草。

研究转基因烟草在弱光下花芽败育与开花情况。