铬污染土壤的菌根-螯合剂联合修复研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1本课题研究意义我国总的土壤重金属污染超标率达到17%，汞（hg）、镉（cd）、铅（pb）及砷（as）这几种污染物的含量呈现从西北到东南、从东北到西南依次升髙的趋势。

近年来，由于人类活动，尤其是化石燃料的燃烧和金属冶炼，土壤中的铅含量快速增长。

土壤中的重金属pb污染不仅能够影响土质、土壤构造和土壤肥力，也会影响土壤微生物和生长于该土壤上的植物。

2. 研究的基本内容和问题

1研究目标选用铅敏感性彩色豆马勃（pisolithus tinctorius）和铅耐性pisolithus. sp两株外生菌根真菌，研究其菌丝细胞质、液泡、细胞间隙中招的含量分布状况；铅对外生菌根真菌生长过程中分泌有机酸的影响，以及草酸分泌关键酶的活性和数量等，为进一步丰富和补充外生菌根真菌的抗铅机制提供科学依据。

2研究内容2．1外生菌根真菌对铅胁迫的响应及铅在菌丝中的分布本研究选用铅敏感性彩色豆马勃（pisolithus tinctorius）和铅耐性pisolithus. sp两株外生菌根真菌作为试验材料，设置不同浓度的pb2 胁迫处理，采用液体纯培养技术，研究了它们的生物量、氮、磷、钾养分吸收状况，以及铅在外生菌根真菌细胞中的分布情况。

2．2铅对外生菌根真菌生长过程中有机酸分述的影响本试验以铅敏感性彩色豆（pisolithus tinctorius）和铅耐性pisolithus. sp两株外生菌根真菌为供试材料，研究招胁迫下外生菌根真菌生长过程中有机酸和氧离子的分泌，旨在明确招对ecmf分泌有机酸影响的动态过程。

3. 研究的方法与方案

1研究方法1．1耐铅菌筛选采用优级纯硝酸铅配置pb2 浓度为0.1g/ml的铅标准溶液待用。

固体培养基（pda）：马铃薯 200 g，葡萄糖 20 g，琼脂 20 g，蒸馏水 1l；液体培养基（改良 pdb）：马铃薯 200 g，葡萄糖 20 g，胰蛋白胨 1%，牛肉膏蛋白胨 1%，蒸馏水 1l。

1.1.1 固体培养配好的 pda 培养基在 121c、0.1 mpa 下灭菌 30 min，待冷却到 50c左右时分别加入过滤（0.45 μm 滤膜）除菌的 pb(no3)2溶液使培养基中 pb 浓度分别为0、100、1000ppm，制成含 pb 浓度不同的 pda 平板。

4. 研究创新点

目前外生菌根真菌重金属铅污染的土壤中的铅胁迫相关的研究较少，而本研究可以为日后植物联合微生物修复铅污染土壤提供理论基础。

5. 研究计划与进展

2017.09-2017.10熟悉实验室基本情况，查阅相关文献；2017.10-2017.11查阅相关文献，向师兄师姐学习基本实验操作，做一些预实验，进行实验条件的摸索；2017.11-2018.01敏感菌株与耐性菌株筛选；2018.03-2018.04开展梯度浓度Pb2 培养并监测数据；2018.04-2018.05整理实验数据，撰写毕业论文，准备答辩。