1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
本课题意义:白鹤芋(spathiphyllum cannifolium)又名白掌,为天南星科多年生草本植物。
它的花姿独特,花柄较长,把雪白的佛焰苞托在植株上,犹如风帆,所以也称为一帆风顺。
白鹤芋原产南美。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标(1)利用白鹤芋的叶片及叶柄诱导获得胚性愈伤组织;(2)对诱导的胚性愈伤组织进行液体悬浮培养;(3)把悬浮培养后的得到胚性细胞团转移至体胚发育培养基,获得植株再生。
研究内容(1)比较不同培养基成分对白鹤芋胚性愈伤组织诱导率及诱导效果的影响,筛选出最佳诱导方案;(2)运用不同激素配比等处理探讨不同碳源、不同生长调节剂组合对胚性细胞团增殖的影响。
(3)建立体胚发育及成熟萌发条件。
3. 研究的方法与方案
研究方法和实验方案:1.1 胚性愈伤组织诱导实验材料为实验室已诱导白鹤芋品种美酒的无菌苗。
胚性愈伤组织诱导培养基成分为:以ms 蔗糖30 g/l 琼脂5.8g /l为基础培养基,添加 tdz(0.5 mg/l)与 2,4-d(1.0mg/l)组合以及6-ba(0.5、1.0mg/l)与 2,4-d(1.0mg/l)组合,ph 5.6,灭菌后分装到培养皿中。
将组培苗叶柄和叶片切成 0.5 ~ 1.0 cm 片段,接种培养基上,(25 1)℃,暗培养 6 ~ 12 周,统计愈伤组织诱导率。
4. 研究创新点
本研究拟在前人研究的基础上,以白鹤芋无菌苗叶片及叶柄作为外植体,进行不同生长素(2,4-D)和细胞分裂素(BA,TDZ)组合试验,这种组合目前研究较少,可通过不同浓度的配比实验,以探讨适宜的胚性愈伤组织诱导条件,并进行胚性愈伤组织液体增殖以及体胚发育和成熟萌发条件试验,建立稳定的白鹤芋体细胞胚胎发生体系,为白鹤芋种苗繁殖及基因转移等研究提供技术基础。
5. 研究计划与进展
2017年3月-2017年8月 利用白鹤芋无菌苗叶片、叶柄进行胚性愈伤组织的诱导;2017年9月-2017年12月 对诱导形成的胚性细胞进行液体悬浮培养;2018年1月-2018年3月 液体悬浮培养后的胚性细胞团分化培养;2018年4月-2018年5月结果分析,课题总结及撰写毕业论文。
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