苦丁茶二咖啡酰奎尼酸抗炎症作用研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

炎症是对感染或组织损伤的一种正常和有益的自我保护反应。

随着炎症的发展，大量的炎症介质最终有助于恢复组织的正常结构和功能。

然而，长期或慢性炎症会导致许多慢性疾病，如癌症，心血管疾病，糖尿病和代谢综合征。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：1. 确定双咖啡酰奎尼酸分子结构；2. 探究提取因素改变对双咖啡酰奎尼酸产率的影响；3. 研究双咖啡酰奎尼酸体外模拟消化、细胞代谢和厌氧发酵的产物；4. 评估双咖啡酰奎尼酸的抗氧化、抗炎症等活性。

研究内容：1. 对苦丁茶进行蒸煮，利用dowex 1-x8阴离子交换柱和hw40s分子筛分离纯化双咖啡酰奎尼酸。

构建双咖啡酰奎尼酸的hplc分析方法，并利用tof-mass测定其分子量，利用nmr等波谱学方法测定其分子结构；2. 逐一改变乙醇浓度、料液比、超声时间、水浴温度和提取时间对苦丁茶粉末进行提取（进行正交试验），将得到的提取液进行hplc分析，计算提取得到的双咖啡酰奎尼酸的量，作出不同条件提取双咖啡酰奎尼酸的响应曲面，对从苦丁茶中提取双咖啡酰奎尼酸的条件进行优化。

3. 研究的方法与方案

拟采取的研究方法和实验方案：1. 从苦丁茶中分离提纯双咖啡酰奎尼酸并测定其分子结构双咖啡酰奎尼酸是苦丁茶中天然存在的较稳定的衍生物，因此我们采取从苦丁茶中直接提取，分离纯化的方式制备高纯度的双咖啡酰奎尼酸。

利用dowex 1-x8阴离子交换柱使样品吸附，然后用一定浓度梯度的醋酸溶液进行梯度洗脱，摸索可以洗脱得到双咖啡酰奎尼酸的醋酸浓度。

再将分离得到的双咖啡酰奎尼酸粗品溶液用hw40s分子筛进行再次提纯。

4. 研究创新点

无

5. 研究计划与进展

研究计划：1. 通过Dowex1-X8分离柱和半制备HPLC技术，从苦丁茶中分离纯化得高纯度的咖啡酰奎尼酸；2. 利用FT-IR、LC-MS和NMR等光谱技术对得到的双咖啡酰奎尼酸进行结构鉴定；3. 通过单一提取因素的改变逐一研究提取条件对双咖啡酰奎尼酸提取得率的影响，并据此进行提取条件优化；4. 通过体外模拟消化及发酵实验研究双咖啡酰奎尼酸的代谢过程及代谢产物；5. 构建细胞和动物模型研究双咖啡酰奎尼酸的抗炎症、抗氧化等活性及其作用机理。

预期进展：2018年2月2018年3月中旬完成从苦丁茶中对双咖啡酰奎尼酸的分离纯化，得到高纯度的双咖啡酰奎尼酸，并确定其分子结构（已基本完成）； 2018年3月中旬2018年3月下旬完成对几种提取因素对双咖啡酰奎尼酸酸提取得率的影响的研究，据此进行提取条件优化；2018年4月上旬2018年4月 下旬 完成对双咖啡酰奎尼酸体外模拟消化、细胞代谢和厌氧发酵的产物探究；完成对双咖啡酰奎尼酸的抗氧化、抗炎症等活性及作用机理的探究； 撰写报告，完成中期答辩；2018年5月 整理实验过程及数据，撰写论文及进行答辩。