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1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
肠道内存在着数量庞大、结构复杂的微生物群落。这个复杂的微生物群落在机体里发挥着多种功能作用，包括消化、代谢等。而近几十年来的证据表明，其和免疫系统有着紧密的联系，特别是对免疫稳态的建立与免疫功能的维持发挥着重要的作用。同时研究者发现益生菌可以通过调节肠道菌群从而促进免疫方面的作用。
大肠杆菌nissle 1917（escherichia coli nissle1917，ecn），是由alfred nissle于1917年分离的一种优质益生菌[1]。研究发现，ecn 能长期稳定定殖于肠道，与肠上皮细胞及肠道其它微生物相互作用，发挥生物学效应。ecn 的生物安全性已经过多年研究确认，其没有致病性大肠杆菌的肠道致病性和肠外致病性，原因在于它的基因组内不含肠毒素、溶血毒素和细胞毒素等致病性因子。此外，ecn 具有六种铁摄取系统，并能分泌微菌素等特殊适应性因子，在与其他微生物的竞争中起到了关键作用[2]。这些特征都是ecn作为益生菌应用在科研及临床中广泛应用的重要依据。ecn 多年来被广泛应用于治疗感染性腹泻、肠道炎症性疾病等肠道疾病，有研究报道ecn能在肿瘤特异性定殖，因而可用于实体瘤诊断的临床研究中，并且其具有作为药物载体对肿瘤进行治疗的潜在应用价值[3]。
c57bl/6小鼠是肿瘤学、免疫学等常用的小鼠品系。它具有乳腺肿瘤自然发生率低，化学物质难以诱发乳腺和卵巢肿瘤的特性。常被认作"标准"的近交系，为许多突变基因提供遗传背景。spf( specific pathogen free，spf) 小鼠，即无特定病原体小鼠，是指除清洁动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病和对实验干扰大的病原的实验小鼠。清洁级小鼠是指在微生物控制方面，除要求必须不带有人兽共患病原和烈性传染病病原及常见传染病病原之外，还要求排除对实验研究干扰大的病原体的小鼠.
2. 研究的基本内容和问题
研究目标
本实验采用清洁级和spf级的c57bl/6小鼠，使用eo771乳腺癌细胞建立乳腺癌移植瘤模型,观察乳腺癌细胞在小鼠中的成瘤情况以及测定相关免疫指标,以明确益生菌nissle 1917 在肿瘤发生中的作用及其可能机制。
3. 研究的方法与方案
研究方法
1．eo771细胞培养
该培养技术由南京农业大学生命科学学院动物系实验室提供
4. 研究创新点
特色或创新之处:
对各组小鼠肠道菌群定植情况进行测定定量，确保在小鼠肠道中EcN的菌群数范围。通过小鼠体内的成瘤情况以及测定免疫细胞的各种指标，明确EcN在肿瘤发生中的作用及其可能机制5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展
2018 年 9 月-2018 年 10 月：进行配制链霉素、小鼠灌胃以及乳腺癌移植瘤建立的知识技术训练与积累；
2018 年 10 月-2018 年 11 月：研究灌胃一次对c57bl/6小鼠乳腺肿瘤细胞免疫功能的影响
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