基于CRISPR/Cas9技术构建miR-210基因敲除细胞系开题报告

全文总字数：10329字

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1研究的意义

在mirna行使其功能的过程中，靶基因的调控是其中的重要部分，但是靶基因的鉴别和验证仍然是mirna领域里一个无法确定的重要问题，所以研究靶基因的筛选能够非常好地反应出mirna在生命活动中重要地机理与功能。另外，靶基因与mirna两者之间存在复杂地关系,所以靶基因与mirna的相互抑制程度将为哺乳类动物细胞提供一种全新调控系统的数据支撑, 进而显示出mirna(如在癌症和缺氧)能够怎么改变靶基因, 从而如何影响生物性状与病理。此实验获得的数据进而也能作为mirna与靶基因间复杂系统相对特异性程度的数据支撑。本课题研究将解决靶基因与mirna的验证问题，通过对mir-210的相关研究，进一步解释靶基因与mir-210的相互作用，此外进一步了解它们在癌症发病过程与缺氧过程中的重要功能。

2microrna研究背景

2. 研究的基本内容和问题

6研究目标

通过对mirna靶基因的检测，预期许多预测靶基因被鉴定为真正的靶基因，它们被mirna不同程度地抑制，为mrna与mirna相对特异性结合提供了数据支撑，进一步解释靶基因与mir-210在癌症发病过程与缺氧过程的相互作用。通过对已验证的靶基因的分析，也能够改善现有mirna的靶基因的预测途径。

7内容和拟解决的关键问题

3. 研究的方法与方案

8研究方法

4. 研究创新点

11特色或创新之处

前期研究表明，mir-210与缺氧途径密切相关，在心脏病和肿瘤细胞中也过度表达。mirna-210有着在心肌梗死中保护心脏功能中的作用。mir-210与多种靶基因存在调控机制，但是靶基因的鉴别和验证仍然是mirna领域里一个无法确定的重要问题，所以靶基因研究中的筛选能够非常好地反应出mirna生命活动中重要地机理与功能。

5. 研究计划与进展

12研究计划及预期进展

2018.09～2018.11 熟悉实验室环境，跟随师兄学习实验相关操作；

2018.11～2018.12 构建预测靶基因的报告基因文库；