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1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
脱落酸(abscisic acid,缩写为aba)是植物五大天然生长调节剂之一,参与呼吸跃变型和非呼吸跃变型果实发育和成熟过程中多方面的生理调控,包括果实的大小、果实的着色、糖分积累、酸性下降及果实的软化等,是果实发育重要的调控激素。
果实品质历来就是人们的关注重点,而含糖量则为果实品质优劣的主导因素,不仅关系着果实风味的好坏,而且是维生素、类胡萝卜素、色素和芳香物质等合成的基础原料,参与新陈代谢底物、能量供给,并在细胞信号转导中起着信号分子的作用。
研究脱落酸对葡萄糖积累的影响,能让我们了解脱落酸对果实发育的调控机制,为生产中提高葡萄果实糖含量提供参考。
2. 研究的基本内容和问题
本研究拟以葡萄作为研究对象,研究生长调节剂 ABA处理后葡萄果实发育过程中果肉糖含量以及转化酶、蔗糖合成酶、蔗糖磷酸合成酶的酶活性变化。具体内容为:测定葡萄在不同浓度的ABA处理下,不同发育时期,果实中的总糖和各糖含量以及相关酶活性,分析ABA在葡萄果实发育中糖积累的作用,进而探究脱落酸对果实发育的调控机制。
3. 研究的方法与方案
采用单因素试验设计,用aba均匀喷施葡萄树体。 aba设置若干个浓度水平。每小区若干株样树,每份处理设重复,以清水处理为对照。设置若干时间节点分别取葡萄样品 ,所有果实样品均取自同一部位,每处理取大小基本一致的果实 2~ 5个,将果肉混合后放入液氮速冻,带回实验室,贮存于 -40 ℃冰箱.
总糖含量提取与测定:取1 g果肉用5 ml蒸馏水匀浆后50℃水浴30 min离心,再加入5 ml蒸馏水重复提取1次,合并上清液定容至50 ml待测。用3,5-二硝基水杨酸(dns)测定总糖和还原糖含量。105℃下烘干2 h后的葡萄糖配成1mg·ml- 1溶液作标准曲线计算含糖量。设5次取样重复,每个样品测定2次取均值。
各糖含量提取与测定:取适量剪碎混匀的样品在110℃下烘10 min后,再经80℃烘干。称取约0.10 g烘干组织,加少量80%乙醇研磨,转入10 ml刻度试管中(总体积 7 ml),80℃水浴30 min,待冷却至室温后定容到10 ml,然后过滤得到糖分提取液。每个样品糖分提取重复3次,叶片和果皮中的糖分提取时,加入少许活性炭以去除色素对比色的干扰。蔗糖的测定采用微量蒽酮法,还原糖的测定采用改良3,5-二硝基水杨酸(dns)法。
4. 研究创新点
本研究采用单因素试验设计,拟以葡萄作为研究对象,测定葡萄在不同浓度的ABA处理下,不同发育时期,果实中的总糖和各糖含量以及转化酶、蔗糖合成酶、蔗糖磷酸合成酶的酶活性变化,分析ABA在葡萄果实发育中糖积累的作用,探究ABA对糖基因表达的影响,为生产中提高葡萄果实糖含量提供参考。
5. 研究计划与进展
本研究计划在2019.3-2019.5完成:
(1)2019.3-2019.4:测定总糖、各糖及酶活性,初步汇总数据,整理表格。
(3)2018.5:实验数据处理、撰写论文。课题毕业论文、开题报告、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。