土曲霉α-L-鼠李糖苷酶表达条件优化及其固定化开题报告

全文总字数：1081字

1. 研究目的与意义

研究目的：通过基因工程手段获得土曲霉α-l-鼠李糖苷酶重组菌，对其表达条件进行优化，并对α-l-鼠李糖苷酶进行固定化研究并优化α-l-鼠李糖苷酶的固定化条件，比较原酶与固定化酶的最适反应温度、 最适ph值及热稳定性与酸碱稳定性，为α-l-鼠李糖苷酶的工业化应用提供了一定的理论依据。

研究意义：α-l-鼠李糖苷酶（rha）是一个重要的水解酶，它能够专一地水解末端含有鼠李糖的各种天然产物。

它在实际工艺中具有很多潜在的应用价值，如工业上用于去除柑桔汁中柚皮苷的苦味，将橘皮苷水解为l-鼠李糖和橘皮素糖苷等。

2. 国内外研究现状分析

迄今为止，大多数α-l-鼠李糖苷酶的结构还没有确定。

而且，由于技术不成熟，α-l-鼠李糖苷酶的生产未能达到工业化水平，生产成本过高，从而限制了应用价值的开放。

我国微生物资源丰富，目前，已筛选包括芽孢杆菌，乳杆菌、链霉菌等细菌和黑曲霉、白曲霉、棘孢曲霉、土曲霉等真菌在内的多个能分泌α-l-鼠李糖苷酶的微生物菌株，并对其培养条件、营养条件、发酵过程进行了优化和调控。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容：(1) 对土曲霉α-l-鼠李糖苷酶的重组表达条件进行优化；(2) 对α-l-鼠李糖苷酶进行固定化研究并优化α-l-鼠李糖苷酶的固定化条件； (3) 比较原酶与固定化酶的最适反应温度、 最适ph值及热稳定性与酸碱稳定性。

2015.2中旬：阅读指定文献，对实验方法及内容进行了解并撰写文献综述。

2015.2下旬：对土曲霉α-l-鼠李糖苷酶的重组表达条件进行优化。

4. 研究创新点

1 利用基因工程手段获得土曲霉α-L-鼠李糖苷酶重组菌，并对其表达条件优化，使其表达具有高效性。

2 利用固定化酶技术将α-L-鼠李糖苷酶固定化，较游离酶相比具有较高稳定性，可重复使用，成本低等优点。