结合型和游离型胞外抗性基因的转化特征及机制开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述1.1前言 自抗生素发现以来，人们将抗生素广泛应用与医疗和养殖业等，抗生素进入人体或动物不能被完全消化或降解，大部分抗生素以原药或粪便的形式排出，在环境中累积，使抗生素抗性基因（args）的产生增加。

早在2004年美国学者rysz和alvarez[1]将抗生素抗性基因作为一类新型环境污染物 ，直到2006年pruden[2]等首次将抗生素抗性基因作为环境新型污染物提出，国际对抗生素抗性基因的关注日益增加，目前国内对抗生素抗性基因的研究以日益增加。

目前发现已有40种四环素类抗生素抗性基因，4种磺胺类抗生素抗性基因和10种β-内酰胺类抗生素抗性基因。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

2.1拟解决的关键问题1．不同附着介质的结合型和游离型胞外抗性基因的转移效率用以下几种附着介质：细菌、土壤、污水厂污泥、微塑料制成不同附着介质的结合型胞外抗性基因，考察各自的转化效率；在不同的水质环境：河水、lb培养基、pbs、不同浓度的氯化钠溶液中考察游离型胞外抗性基因的转化效率，上述介质和水样灭菌之后使用。

2. 结合型和游离型胞外抗性基因的转移差异及内在机理考察上述转移后的抗性基因在受体表达后耐药水平（ec50）；考察不同附着介质的zeta电位；附着介质结合dna之后的zeta电位；转移前后受体菌的zeta电位用透射电镜观察不同转化阶段（反应中、37度培养1h过程中以及转化完成的菌落）的受体菌的形貌。

2.2研究手段1、在实验室提取质粒，附着在不同的介质：细菌、土壤、污水污泥、微塑料制成不同附着介质的结合胞外抗性基因，考察各自的转化效率。