1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
1.课题研究的目的与意义 全局调控蛋白irre是异常球菌属中特有的一种dna损伤修复调节因子,可以显著提高细胞受到损伤时各修复基因的表达。
在目前已经完成测序的异常球菌中共发现7种不同来源的irre蛋白,经序列比对与同源建模,发现其氨基酸序列相似性较高且具有相同的保守结构域,这可能预测了其功能上的相似性。
此外,irre在大肠杆菌及油菜中表达后,能明显增强宿主的耐盐性,体现了较高应用价值。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
1、先构建含有IrrE蛋白组成型表达的质粒;2、然后考察构建成功的重组菌对各种耐受力的提升能力;3、再利用易错EP-PCR构建启动子突变文库;4、最后利用不同强度的启动子调控IrrE蛋白的表达量,研究耐受力的提升。
5、还要学习基因工程方面的操作及其原理,包括引物设计、PCR、酶切、连接、核酸凝胶电泳等;6、学习摇瓶厌氧发酵的过程及原理;7、学习NBS发酵罐的使用;8、学会使用HPLC及其原理
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