杨树遗传转化体系的优化开题报告

1. 研究目的与意义

1.目的

本课题旨在通过正交试验的方法研究得出南林895杨的高效转化体系。

2.意义

2. 国内外研究现状分析

遗传转化体系就是从质粒选取构建到转化等利用各种分子或基因工程手段构建目标转化子，然后让转化子表现出相应性状或表达目标产物的整个过程中所运用的方法，技术，以及构建的材料和产物。

转化率低是目前杨树育种中存在的主要问题之一，主要表现为：实验重复性差、随机性大、植物基因型依赖性强。农杆菌介导法是杨树基因工程研究中最常用的方法，但是常因转化过程中农杆菌的泛滥而造成转化植株的死亡，进而导致转基因失败。这需要根据转化植株的生理特点，结合特定的转化方法，从技术因素到环境因素，多方面创造条件，提高转化率和实验的可重复性。

目前转化体系的优化已在多种作物上得到应用，如：杨树、银杏、番茄、马铃薯、玉米等。其中杨树是根癌农杆菌的天然寄主,因此其可以方便地利用根癌农杆菌介导进行遗传转化。自1986年 minocha 等获得了第一个杨树转基因植株以来 ,杨树转基因技术日新月异 ,已有近二十个杨属种或杂种获得了转基因植株 ,一些重要的目的基因如抗虫基因、降低木质素基因、抗除草剂基因等被转入杨树。杨树遗传转化研究首先是1986年由parsons用野生型根癌农杆菌转化无性系h₁₁(p.trichocarpadeltoides)的茎段,证实了来自于根癌农杆菌a281株系的农杆碱合成酶基因及a348株系的章鱼碱合成酶基因在瘤组织内稳定表达。

3. 研究的基本内容与计划

1.研究内容

（1）转化效率的影响因素有很多，如菌株、本实验重点研究预培养时间、菌液浓度、侵染时间及共培养时间对转化率的影响。同时还另有补充实验进行头孢浓度及卡那浓度的筛选。

（2）检测转化的阳性率及获得转基因植株。

4. 研究创新点

通过正交试验的方法研究南林895杨的高效转化体系，不仅可以得到大量的数据增加实验结果的可靠性，而且减少了实验的次数，节省了时间、人力及物力。同时高效的南林895杨的转化体系的建立对于以后南林895杨的转化研究具有重要的意义。