黑曲霉木糖苷酶基因与木聚糖酶基因的融合表达开题报告

1. 研究目的与意义

木聚糖是植物细胞壁中主要成分，也是自然界中第二丰富的可再生资源。但与纤维素不同的是降解木聚糖至少需要2种酶的参与。其中，木聚糖酶和木糖苷酶是关键因素。通过融合表达，能够更有效的对木聚糖进行生物降解。同时，改善木糖苷酶酶学性质以及提高表达量。

2. 国内外研究现状分析

β-木糖苷酶 (ec 3.2.1.37)是一类可以将木寡糖(如木二糖，木三糖等)水解为木糖的生物催化剂，其与木聚糖酶协同作用，可将木聚糖彻底分解，是木聚糖降解的关键酶之一，已在能源，造纸等多个领域具有广泛应用。

另外，这类酶在医药工业的应用前景也越来越引起人们的广泛关注。

但因为木糖苷酶表达量低，难以实现工业化应用。

3. 研究的基本内容与计划

内容：(1)通过重叠延伸pcr以及加入酶切位点，对来自aspergillusniger nl-1木糖苷酶基因xlnd和木聚糖酶基因xynb进行融合。

(2)将融合后的基因在真核表达系统毕赤酵母中进行表达和分析，对重组酶酶学性质进行研究。

(3)重组酶应用试验。

4. 研究创新点

主要技术为重叠延伸PCR，通过特异位点的设计，实现木糖苷酶和木聚糖酶的融合表达，成为改变酶学性质和提高表达量的有效途径。