稻瘟病菌核酸合成相关基因MoURA3基因的敲除开题报告

1. 研究目的与意义

针对稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae），构建该病原菌转运蛋白MFS1基因的敲除载体，并通过聚乙二醇介导的原生质体转化进行基因敲除；筛选出2-3个基因敲除转化子，并对其致病性等相关表型进行测定

2. 国内外研究现状分析

近十多年来,水稻-稻瘟病菌互作机制研究取得了很大发展,包括稻瘟病菌入侵全过程的动态监测,稻瘟病菌全基因组的测序、基因预测和功能分析,抗病蛋白与无毒蛋白互作证据的发现等,nbs鄄lrr 在水稻抗病过程中的功能等。

水稻-稻瘟病菌的互作已成为研究植物与病原物互作的模式系统,但水稻-稻瘟病菌互作方面仍有以下一些问题有待进一步的研究。

虽然在这方面已经取得了一些进展，真正的权力，这个模型系统将无法完全实现，直到饱和遗传图谱，以允许快速的基于地图的克隆。

3. 研究的基本内容与计划

稻瘟病菌聚乙二醇介导的原生质体转化1）基因敲除载体构建：根据magnaporthe oryzae基因组网站下载mfs1上下游基因序列，根据同源重组原理，设计敲除载体构建引物。

2）原生质体转化：载体构建完毕后，提取质粒，进行原生质体转化。

该转化体系主要包括原生质体制备；peg介导的转化两部分。

4. 研究创新点

本研究中利用同源重组原理构建稻瘟病菌转运蛋白MFS1基因敲除载体，并通过原生质体方法进行转化并筛选出该基因敲除突变体，与其他物种中该基因研究结果比较，分析其异同点，指出研究不足以及待解决的问题