1. 研究目的与意义
1.1 研究目的
植物细胞色素p450(cytochromep450,cyp)酶成员庞大,参与多种次生代谢途径,调控植物生长发育与抗逆反应,是一种重要的超级家族。石榴是国家规划特色经济林树种之一,具有重要的医学保健价值,其cyp超家族成员多,参与功能广泛,如调控果皮着色、参与木质素代谢、响应非生物胁迫等,是研究cyp功能与进化的模式物种。
1.2 研究意义
2. 国内外研究现状分析
2.1 石榴
石榴(punica granatum) 是千屈菜科(lythraceae)石榴属(punica l.) 落叶果树,起源中亚,是古老的保健水果,被誉为超级水果[1]。栽培历史悠久。石榴是一种集生态、经济、社会效益、观赏价值和保健功能于一身的特色资源植物[2]。石榴适应性强,在世界范围内广泛栽培[3]。我国目前已形成了河南荥阳和开封、陕西临潼、山东枣庄、安徽怀远、四川会理、云南蒙自和新疆叶城8大石榴主产区[2]。石榴果实富含花青苷、黄酮、安石榴苷等多酚类物质,特别是安石榴苷等鞣花单宁类物质临床医用和保健价值高,具有潜在的抗氧化、抗癌、抗菌等功能。
石榴是国家规划特色经济林树种之一,具有重要的医学保健价值,其cyp超家族成员多,参与功能广泛,如调控果皮着色、参与木质素代谢、响应非生物胁迫等,是研究cyp功能与进化的模式物种。其转录组研究对解决基因进化、遗传育种以及生态等诸多方面的问题具有重要意义。
3. 研究的基本内容与计划
3.1 石榴转录谱
选用石榴成熟果实的果皮,采用参考文献提取总rna。构建双末端rna-seq文库,并根据illumina操作说明(illumina,usa)使用illumina hiseq 4000平台进行测序。使用ngsqctoolkit (v2.3.3)软件进行原始读长(read),对原始数据进行质控,过滤掉不完整序列、重复序列、接头序列、载体序列。应用velvet (v1.2.10)和oases (v0.2.08 )对质控后的序列进行拼接。运用cd-hit-est软件过滤拼接体中的冗余序列,用transdecoder(http://transdecoder.github.10)预测非冗余拼接体转录物的开放阅读框(open reading frame ,orf),收集完整的orf序列作为石榴的转录谱。
3.2 基因组序列
4. 研究创新点
(1)目前对石榴转录组的研究较少,我们首次在是石榴转录组中挖掘出cyp候选蛋白;
(2)运用本课题组自行开发的大规模家族鉴定方案,极大地提高了鉴定结果的可信度以及工作效率;
(3)目前在malvids分支中cyp进化研究鲜有报道,本研究可以为植物cyp家族的分类学和进化研究提供资源;
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